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文献和实验1);(5)NaCl 溶液(1 mol/L);(6)RNaseA;(7)TE液;(8)体积分数大于99.5%和等于76%乙醇. 1.3 实验方法 首先采用标准的水稻DNA抽提方法(CTAB法),但效果不理想.后通过查阅相关资料,我们采用改良的CTAB法,具体方法如下: (1)每份材料取叶7 g,加液氮后,用乳钵磨碎,于-20℃冰箱中冷冻10~15 h. (2)分别加入β-巯基乙醇210 μL,搅拌均匀. (3)加入1.5%的CTAB液20 mL,搅匀,在56℃条件下水浴20 min. (4)转入50
和柱层析 方法同Marsshall法。3.改良法 (1)试剂和材料 ①0.01mol/L(pH7.2)PBS配法中,校定pH至7.2。NaCi 18g、Na2HP04 1.15g,溶于2000ml蒸馏水 ②0.5mol/L(pH9.0)碳酸盐缓冲液配法 取0.5mol/LNazCOs(5.3%)10ml加入0.5mol/LNaHC03(4.2%)90ml,混合后,校定pH至9.0。 ③3%碳酸钠水溶液配法 称L 5g无水碳酸钠充分溶解于50ml灭菌蒸馏水中即成
中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)是一种胞内水解酶。测定其活性对于某些血液病的诊断、鉴别诊断和疗效观察有重要价值。目前国内推荐的改良Gomori钙钴法(简称改良法),其孵育时间长达4 h,试剂配制繁琐,我们将生物化学中有关磷酸基受体缓冲液的原理应用于NAP染色,即在改良法的基础上,以2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)为缓冲体系,建立一种简便快速染色法(简称快速法),孵育时间只需15 min,报道如下。 一、材料与方法
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