SD琼脂系列酵母缺陷培养基（一缺，二缺，三缺，四缺）

价格：￥890

品牌：兰博利德（LABLEAD）已认证

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30份

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1、试用品规格：1袋（0.5L）
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3、联系时间：试用活动结束后的 1 天内
4、申请要求：每个课题组可申请配套的两种
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3年
供应商：
兰博利德
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常温保存
规格：
0.5L*10

酵母双杂交实验（Yeast Two-Hybrid, Y2H）

酵母双杂交实验是一种经典的分子生物学技术，主要用于检测和验证蛋白质之间的相互作用。该技术可快速发现新的互作蛋白、定位蛋白互作关键结构域并初步构建蛋白互作网络，广泛应用于信号通路解析、疾病靶点挖掘等研究。

酵母双杂交系统

	GAL4 系统	LexA系统	ProQuest系统	Split-Ubiquitin 系统
载体	pGBKT7(BD) pGADT7(AD)	p8op-LacZ、pLexA(BD) pB42AD(AD)	pDEST32(BD) pDEST22(AD)	pBT3系列(BD) pPR3 系列(AD)
转化标记	pGBKT7-TRP1 pGADT7-LEU2	p8op-LacZ-URA3 PLexA-HIS3 pB42AD-TRP1	pDEST32-LEU2 pDEST22-TRP1	pBT3系列-TRP1 pPR3 系列-LEU2
菌株	Y2H Gold/AH109	EGY48	MaV203	NMY51
筛选培养基	u SD/-Leu SD/-Trp u SD/-Leu-Trp u SD/-His-Leu-Trp u SD/-Trp-Leu-His-Ade	u SD/-Ura SD/-His-Ura u SC/-His-Ura with Gal/Raf u SD/-His-Trp-Ura u SC/-His-Leu-Trp-Ura with Gal/Raf	u SD/-Leu-Trp u SD/-His-Leu-Trp u SD/-Leu-Trp-Ura	u SD/-Leu-Trp u SD/-His-Leu-Trp u SD/-Ade-His-Leu-Trp
报告基因	Y2H Gold：HIS3、ADE2、MEL1、AbAr AH109：HIS3、ADE2、MEL1、LacZ	LEU2、LacZ	HIS3、URA3、LacZ	HIS3，ADE2和LacZ
相关试剂	3-AT、X-α-Gal、AbA、X-Gal	X-Gal	3-AT、X-Gal	3-AT、X-Gal
优势	1. 技术成熟，商用文库和菌株资源丰富。相关经验丰富。 2. 灵敏度高，适合常规核蛋白互作及高通量筛选。 3. 操作简便，梯度筛选降低假阳性。	1. LexA 无固有激活活性，自激活背景远低于 GAL4 系统。 2. 适合研究有弱自激活的诱饵蛋白，结果更可靠。	1. 采用Gateway技术可以快速构建载体。 2. 三种不同的报告基因可快速清除假阳性。 3.载体含ARS/CEN序列可以维持低拷贝数，能够控制过度表达并提高重现性。	可以用于膜蛋白（细胞膜/内质网膜）、非核胞质蛋白的互作验证。
缺点	1. 适合核蛋白，无法检测膜蛋白/非核胞质蛋白。 2. 部分诱饵蛋白存在自激活，可能需要改造。 3. 3-AT 浓度需预实验优化，易因浓度不当漏检。	1. 依赖蛋白核定位，不适用于膜蛋白。 2. 商用资源（文库和菌株）少于 GAL4 系统。 3. 操作流程更加繁琐。	1. 依赖蛋白核定位，不适用于膜蛋白。 2. 需要掌握Gateway克隆技术。 3. 试剂盒价格昂贵，成本较高。 4. 目前经验分享较少。	1. 载体构建复杂，需精确设计膜定位信号。 2. Cub/Nub标签可能干扰蛋白的天然功能或定位。 3. 操作流程比较复杂。

酵母双杂交实验流程

产品细节图片1

1. 载体构建

利用无缝克隆或者T4连接酶等方法构建载体。

BD-Bait载体：将“诱饵”蛋白的基因克隆到表达载体中，与DNA结合结构域融合。

AD-Prey载体：将“猎物”蛋白（或候选基因文库）的基因克隆到另一个表达载体中，与转录激活结构域融合。

2. 酵母感受态的制备

根据实验选择的系统确定酵母菌株，该菌株的基因组中已整合了由目标转录因子调控的报告基因（如 HIS3、ADE2、LacZ等）。然后制备相应的酵母感受态细胞或者购买商品化的酵母感受态细胞。

3. 诱饵重组质粒毒性和自激活检测

将构建好的诱饵质粒和另一个表达载体的空载转入酵母感受态细胞，观察酵母在对应缺陷型培养基上的生长情况。若有自激活则需要添加一定浓度的抑制剂或者截短诱饵蛋白来抑制自激活。

4. 酵母共转化

采用醋酸锂法或电转法将两种载体共转化至同一酵母感受态细胞，同时设置阳性、阴性对照。

阳性对照：共转化已知互作蛋白组合。

阴性对照：共转化无关联蛋白组合。

5. 互作验证

将共转化后的酵母细胞涂布在对应的二缺培养基上，以筛选出同时成功转入两种载体的阳性克隆。然后将阳性克隆点种到更高严谨性的三缺/四缺培养基，并可结合显色反应，判断蛋白是否相互作用。

注：对于已经检测到有自激活现象的蛋白，还应在培养基中添加自激活抑制剂（抑制剂的浓度由实验验证确定）。

6. 结果分析

观察不同缺陷型培养基上酵母的生长情况，能在严格培养基生长并有显色反应，说明诱饵与猎物蛋白存在相互作用。

注：酵母双杂交技术存在假阳性/假阴性风险，且受酵母细胞翻译后修饰、蛋白核定位限制，实验结果需结合 Co-IP、Pull-down 等技术进一步验证。

相关产品：

名称	货号	用途	特点
YPDA培养基	Y0004	用于酵母菌株的培养，制备感受态
YPD Plus培养基	Y0003	用于转化时菌体重悬，提高转化效率
Agar	QZ02	用于配置固体培养基
SD/-Ura with Agar	Y24048102	检测质粒是否转入酵母细胞	缺陷型培养基均为即用型粉剂，无需调节pH，规格为0.5L*10，每包可以配制500ml培养基，使用便捷，结果稳定可靠。
SD/-Leu with Agar	Y24048104
SD/-Trp with Agar	Y24048101
SD/-Leu-Trp with Agar	Y24048220	检测诱饵和猎物质粒是否转入酵母
SD/-His-Leu-Trp with Agar	Y24048323	用于诱饵和猎物蛋白互作检测
SD/-Ade-His-Leu-Trp with Agar	Y24048406
SD/-His-Trp-Ura with Agar	Y24048325
SD/-Leu-Trp-Ura with Agar	Y24048302
SD/-Ura Broth	Y14028102	SD液体培养基，添加琼脂可以配制相应的固体培养基，也用于酵母菌的培养
SD/-Leu Broth	Y14028104
SD/-Trp Broth	Y14028101
SD/-Leu-Trp Broth	Y14028220
SD/-His-Leu-Trp Broth	Y14028323
SD/-Ade-His-Leu-Trp Broth	Y14028406
SD/-His-Trp-Ura Broth	Y14028325
SD/-Leu-Trp-Ura Broth	Y14028302
SC/-His-Ura Broth	Y408201	不含碳源的酵母缺陷型培养基，可以根据实验需要添加碳源
SC/-His-Leu-Trp-Ura Broth	Y408407	不含碳源的酵母缺陷型培养基，可以根据实验需要添加碳源
D-Raffinose 棉子糖	J392	酵母培养基中常用的碳源
20%棉子糖溶液	G2846	过滤除菌，酵母培养基中常用的碳源
鲑鱼精DNA	D1626	包裹质粒DNA，促进质粒进入酵母细胞，还可防止质粒被DNA酶降解
10mg/ml鲑鱼精DNA溶液	D1627	包裹质粒DNA，促进质粒进入酵母细胞，还可防止质粒被DNA酶降解
3-AT	A8056	当报告基因是HIS3时，在培养基中添加，能够抑制自激活
X-α-gal	X0200	当报告基因是MEL1时，可以通过显色反应验证互作
X-gal	X0300	当报告基因是LacZ时，可以通过显色反应验证互作
酵母转化试剂盒	YT0010	采用聚乙二醇(PEG)/ LiAc为基础的方法来制备和转化活性酵母细胞	包含酵母感受态制备或转化需要的各种试剂，使用方便快捷
酵母转化试剂盒	YT0015	采用聚乙二醇(PEG)/ LiAc为基础的方法来进行酿酒酵母质粒转化实验	包含酵母感受态制备或转化需要的各种试剂，使用方便快捷
酵母菌落PCR试剂盒(碱裂解法)	L7278	用于酿酒酵母、毕赤酵母等菌株转化后阳性克隆菌落的PCR筛选和鉴定

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【干货分享】酵母产品合集

40 人阅读发布时间：2025-10-20 15:35