- ￥90
- EnkiLife
- PA10006
- 2026年02月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Citrate Antigen Retrieval Buffer (20×, pH 6.0)
- 保质期：
12个月
- 保存条件：
RT
- 规格：
100mL
柠檬酸抗原修复液是免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)等免疫组织化学实验的核心试剂，主要用于甲醛固定石蜡包埋(FFPE)组织切片的抗原表位暴露，是新手做组化实验必掌握的关键步骤。
其核心修复原理在于：甲醛固定组织时会发生甲醛交联反应，组织蛋白之间、蛋白与核酸之间形成大量亚甲基桥共价交联，把目标抗原包裹在蛋白网状结构内，导致抗体无法接触抗原表位，出现假阴性或染色弱的情况，而柠檬酸抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液，搭配高温加热条件，通过热诱导抗原修复（HIER）发挥作用，高温可破坏甲醛形成的亚甲基桥，解开蛋白交联结构，弱酸环境能维持蛋白天然构象，避免抗原变性失活，进而让被遮蔽的抗原表位重新暴露，与特异性抗体高效结合。
作为通用型、最常用的抗原修复液，它适合大多数胞浆、胞膜抗原，以及对pH敏感、不耐强碱的抗原，新手入门可优先选用，主要应用于石蜡切片免疫组化IHC、石蜡切片免疫荧光IF和组织芯片的抗原修复。
工作液配制
取 10 mL 20× 浓缩液（本产品），加入 190 mL 蒸馏水，混匀即可。稀释后的工作液建议当日使用完毕，短期可4℃保存。
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文献和实验一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温
水质对免疫组化染色结果的影响显著: 在免疫组化染色过程中，实验用水一般用来配制两种试剂: 01 抗原修复液 包括柠檬酸(pH6.0) 、EGTA(pH 9.0) 和EDTA(pH9.0) 等种类，主要用于抗原修复。在免疫组化染色前，必须进行抗原修复，使抗原决定簇充分暴露，以便完全彻底地与抗体结合。未进行抗原修复的抗体即使阳性，其阳性细胞数量及染色强度要明显比进行过抗原修复的少、弱。电导率高的水因杂质存在容易影响溶液pH值，pH值或高或低都会造成抗原修复不佳，抗原决定簇不能完全彻底暴露
世界上公认的方法就是必须进行抗原修复。 （二） 用什么方法进行抗原修复？ 至今为止，抗原修复有许多种方法，在这些方法中，有的是根据抗体的要求来进行，有的是根据抗原的表达程度来进行，我们则对每种病例每项检测，都要求必须进行抗原修复，以达到抗原全面表达的最佳状态。 （1）物理化学试剂抗原修复法。 1. 真空负压抗原修复法： ① 切片脱蜡至水。 ②0.3%H2 O2 甲醇真空负压处理5分钟。 ③自来水洗，蒸馏水洗。 ④0.01M柠檬酸盐缓冲液（PH6.0），真空
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