- ￥1099
- 研匠
- rcnexo121
- 2026年03月06日
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- 文献和实验
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- 保存条件：
储存-20℃ 1年
- 库存：
1000
- 规格：
20ul
Exosomes Green Fluorescent Labeling Kit
外泌体绿色（PKH67）荧光标记试剂盒
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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外泌体绿色（PKH67）荧光标记试剂盒 |
rcnexo121 |
20ul |
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运输和保存方法：-20℃避光保存，有效期12 个月。
一、产品简介：
外泌体绿色荧光标记试剂荧光染料能将绿色荧光染料（PKH67）结合到外泌体囊泡结构的脂质尾巴上。该试剂盒可以在染色过程中增加染色效率，同时维持细胞活力。可用于外泌体的标记染色实验，监测细胞吞噬作用。
观察荧光：激发波长（Ex）-490nm；发射波长（Em）-502nm.
二、产品组分：
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PKH67母液 |
20μL |
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Dilution Buffer |
200μL |
注：单次最大标记量为200ug.
三、使用方法：
1.外泌体蛋白定量：取适量外泌体进行BCA 蛋白浓度测定以确定外泌体蛋白量；
2.染料工作液制备：用Dilution buffer 将PKH67 储存液稀释10 倍，配制成染料工作液（避光操作，工作液应根据实验用量适当配置，现配现用）；
3.外泌体染色：
（1）在外泌体中加入染料工作液，建议加入剂量如下：
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外泌体蛋白量 |
加入染料工作液（ul） |
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10-200ug |
50ul |
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200~500 ug |
100ul |
（2）加入染料工作液后将离心管盖紧，通过涡旋振荡器混匀1 min，再静置孵育10min；
（3）向孵育后的外泌体-染料复合物中加入10 mL 的1x PBS 混匀；
（4）按照外泌体提取方法再次提取外泌体以去除多余染料；
（5）取200 μL 1×PBS 重悬沉淀物，沉淀即为染色后的外泌体。
注意：过度染色会导致外泌体膜完整性丧失，最佳PKH67 染料/外泌体用量需根据自身实验而决定。
注意事项:
1. PKH67 母液易水解，建议分装保存，分装后用封口膜密封保存；
2. PKH67 工作液应现配现用,不能能提前配制，否则将影响染色效果；
3. PKH67 溶解液在较低温度下会凝固而粘在管底内，可以37℃水浴片刻至全部融解后使用。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5. 本产品仅作科研用途！
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文献和实验主要分为两大类，第一类是 PKH67（绿色荧光）/PKH26（红色荧光），由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合，所以染色效果较好，应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料，包括DiI（橙色荧
细胞膜染料+外泌体染料双染策略，彻底解决外泌体摄取实验中的假阳性问题
actin 摄取实验对比，图 Fig.4a 中可以看到 CellLINK 555 标记的清晰的红色膜轮廓，经过 EvLINK 505 标记后的绿色外泌体分散在细胞膜内；Yu 等使用 F-actin 标记细胞膜轮廓，PKH-67 标记外泌体，尽管共聚焦显微镜下观测到的外泌体明亮的绿色荧光，然而该绿色荧光呈弥散状分布，难以较好区分外泌体与细胞膜。 Fig.4 （a）EvLINK 505 标记的外泌体+CellLINK 标记细胞膜和（b）PKH-67 标记的外泌体+F-actin 标记细胞膜摄取
质组分析（iTRAQ、TMT、Label-free） 外泌体标记或示踪： 亲脂染料标记外泌体：目前已发表的外泌体文章中，外泌体大多使用亲脂性染料进行标记，体内和体外都有较多应用。亲脂性染料主要分为两大类，第一类是PKH67（绿色荧光）/PKH26（红色荧光），由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合，所以染色效果较好，应用较广泛。 图六 PKH67标记的外泌体与神经元之间相互作用（Juan Carlos Polanco et al., Acta Neuropathol Commun. 2018）
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