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- 文献和实验
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卷
一、产品简介
PVDF膜又称聚偏二氟乙烯(Polyvinylidene Fluoride,PVDF)印迹膜,具有疏水性,其均匀的孔隙结构能够结合生物分子。0.45 μm和0.2 μm两种孔径规格最为常用,主要用于免疫印迹(即Western blot),可以将蛋白质从各种凝胶基质转移到膜上。
二、 产品特点

三、 产品性能
① 转印效率高

使用梯度稀释的小鼠脑组织总蛋白样本进行SDS-PAGE,分别转印到0.45 μm的PVDF膜(达领生物·DLW301和进口品牌M),随后进行丽春红染色分析。结果表明,达领生物·DLW301的蛋白吸附性能优于进口品牌M。
使用梯度稀释的小鼠脑组织总蛋白样本进行SDS-PAGE,分别转印到0.45 μm的PVDF膜(达领生物·DLW301和进口品牌M),随后使用相同实验条件分别对β-actin(42 kDa)和NEDD4L(125 kDa)进行Western Blot检测。结果表明,达领生物·DLW301最低检测限度与进口品牌M一致,均可检测至ng级总蛋白,且蛋白吸附性能优于进口品牌M。
② 膜再生性好
使用梯度稀释的小鼠脑组织总蛋白样本进行SDS-PAGE,分别转印到0.45 μm的PVDF膜(达领生物·DLW301和进口品牌M),先对HSP90(90 kDa)进行Western Blot检测,之后使用抗体剥离液进行膜再生,再生后对β-actin(42 kDa)进行Western Blot检测。结果表明,达领生物·DLW301和进口品牌M剥离再生性基本一致。

使用梯度稀释的小鼠脑组织总蛋白样本进行SDS-PAGE,分别转印到0.45 μm的PVDF膜(达领生物·DLW301和进口品牌M),先对HSP90(90 kDa)进行Western Blot检测,之后使用抗体剥离液进行膜再生,再生后对Lamin B1(66 kDa)进行Western Blot检测。结果表明,达领生物·DLW301比进口品牌M剥离再生性更佳。
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文献和实验力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜(NC膜)的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的应用。在非离子型的去污剂作用下,结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小,要选择不同 孔径的硝酸纤维素膜(NC膜)。因为随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm,蛋白的转移就很难进行了。因此,我们通 常用0.45μm和0.2μm两种规格的硝酸纤维素膜。大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜,小于20kD的蛋白就要用
Western blot中硝酸纤维膜和PVDF膜的选择及其特点
膜)的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的应用。在非离子型的去污剂作用下,结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小,要选择不同 孔径的硝酸纤维素膜(NC膜)。因为随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm,蛋白的转移就很难进行了。因此,我们通 常用0.45μm和0.2μm两种规格的硝酸纤维素膜。大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜,小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了,如果用 0.45μm的膜就会发生“Blowthrough
:millipore PVDF膜 0.45 um 转膜方式(恒压、恒流):湿转,恒流0.3A。 转膜时间:180min 设备:“Bio-Rad ” 建议:电转保持电压在70 V以上,保持低温,如果电压低过70就需要换缓冲液了。 蛋白来源:白血病细胞
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










