- ￥2000 - 8000
- 湖北省武汉市
- Californiconus californicus Mu-conotoxin-like Cal 12.2a 重组蛋白表达
- 2025年11月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
大肠杆菌系统重组蛋白表达
- 提供商：
普健生物（武汉）科技有限公司
Uniprot号：A6YR42
基因名：
蛋白名：Mu-conotoxin-like Cal 12.2a
蛋白别名：
Conotoxin CalTx 12.2.1A, Conotoxin Cl12a
服务内容：
| 服务项目 | 客户提供 | 服务内容 | 服务周期 | 交付内容 |
|---|---|---|---|---|
| 大肠杆菌系统 蛋白表达 |
基因序列 | 方案沟通 | 1天 | 方案报告 |
| 密码子优化和基因合成 | 5天 | 基因合成报告 | ||
| 表达纯化测试 | 3天 | 表达纯化测试报告 | ||
| 1L表达及纯化 | 3天 | 蛋白样品(3-5mg)及报告 | ||
| 放大发酵及纯化 | 7天 | 纯化的蛋白及报告 |
案例展示：
A6YR42相关研究文献：
1. A diverse family of novel peptide toxins from an unusual cone snail, Conus californicus.
2. Evolution of Conus peptide toxins: analysis of Conus californicus Reeve, 1844.
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文献和实验夹心法ELISA检测人α2a,α2b干扰素(α2a,α2b)
重组人α2a/α2b干扰素(rHuIFN-α2a、rHuIFN-α2b)生产流程中不可缺少的一环是产品的质量监控，通常采用的是HEp-2/VSV或Wish/VSV系统检测干扰素的生物活性。此系统常由于VSV或细胞的影响而不够稳定，且检测周期较长。我们用自制的2种针对rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b的单克隆抗体(McAb)建立了定量检测rHuIFN-&alpha
7. 4000r/min离心5min，去掉800μL上清，混匀菌液，用灭菌玻璃推棒涂布于含有X-gal、IPTG、Amp 的LB琼脂平板培养基上，37℃正置吸收30min。 8. 倒置平皿37℃培养过夜（12～16h）。在含有X-gal、IPTG、Amp 的LB琼脂平板培养基上培养，形成单菌落。 9. 计数白色、蓝色菌落。挑选白色菌落，可使用菌落PCR 法确认载体中插入片段的长度大小。 注意事项 1. 连接反应的温度：DNA连接
4 °C离心30 min，以分离上清和沉淀。1.5 ml 裂解缓冲液重悬沉淀。分别取10 μl上清和重悬液为样品。 7) 加入10μl谷胱甘肽琼脂糖4B 珠，4 °C孵育 1 hr并用 200 μl 1 x PBS洗3次。离心后收集上清。 8) 10 μl洗脱缓冲液(20 mM谷胱甘肽， 75 mM Tris pH 8.0, 150 mM NaCl)清洗柱子。 9) 每一步取的样品进行合适浓度的 SDS-PAGE，以确定表达纯化的条件和蛋白表达
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