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\N
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99
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上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500ml
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文献和实验4.0。(2) 10×磷酸盐-NaCl 缓冲液(PBS):100mmol/L PBS,pH7.4。称NaCl 80g、Na2HPO412H2O 29g、KCl 2g、KH2PO4 2g,加蒸馏水溶解,加入100mmol/L EDTA 20ml,用去离子水定容至l000ml。(3) 透析液 10mmol/L Na2HPO4-KH2PO4缓冲液,含15mmol/L NaCl,pH7.2。(4) 硫酸铵。(5) 辛酸。四、操作步骤 1、抗血清用4倍体积乙酸-乙酸钠缓冲液稀释,用0.1mol/L NaOH调至血清
或者 Mowiol 封片。 氨乙基咔唑 氨乙基咔唑(AEC)产生红色产物,其敏感性低于 DAB,但可用于 DAB 反应产生较高背景或要求改变产物颜色的实验。此产物可溶于醇,但不溶于水。 1. 需要的溶液和特殊设备 0.4% AEC用 N,N —二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L 乙酸钠缓冲液(pH5.2),过氧化氢, Gelvatol 或 Mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。 2. 操作步骤 (1) 用 l mL DMF 溶解 4 mg AEC。AEC
50μl的3mol/L乙酸钠和2ml预冷无水乙醇,上下颠倒几次混匀,可见絮状白色沉淀物。 7.置液氮5~10min,12 000r/min离心10min沉淀DNA,去上清,真空抽干或风扇下吹干残存液体。 8.加50~100μl TE缓冲液,另加5μl RNase,37℃水浴30min。 9.取20μl加上样缓冲液2~5μl,1%琼脂糖凝胶电泳(电压50V,1.5~2h),UV下观察。 方法二: 1.离心收集细胞(5×106),PBS(无Ca2+和Mg2+)洗1~
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