LX-2/GFP人肝星状细胞绿色荧光标记

LX-2/GFP人肝星状细胞绿色荧光标记

产品编号：CL-778h

一、细胞介绍

LX-2细胞系由发表该细胞文章的第一作者命名，这个细胞又叫Lieming Xu-2，这是一个永生化的细胞。该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。

二、细胞特性

来源：肝

形态：星状细胞，贴壁生长

含量：>1x10⁶cells

规格：T25瓶x1（常温运输）/ 含有1mL细胞悬液的冻存管x2（干冰运输）

用途：本产品仅供实验室研究使用，不可用于动物或人类治疗或诊断用途

注意：该细胞为稳定转染GFP的细胞，随细胞传代次数的增加，其GFP荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。建议收到细胞后至少传3代，冻存留种后再进行筛选。初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养，若无细胞漂浮或者漂浮较少，即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中，漂浮细胞大于60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约80%，可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含药完全培养基正常培养。

三、完全培养基及冻存液配制

1) 该细胞完全培养基为：RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S

2) 培养环境：37℃；95% Air，5% CO₂；培养箱湿度为70%-80%

3) 冻存液：推荐使用非程序无血清细胞冻存液（货号：RC-0102）

四、收货注意事项

1) 收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染，冻存细胞若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落，请拍照后及时与我们联系。

2) 75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于培养箱静置约2-3h。在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5×物镜）下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10×和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

3) 对于贴壁生长的细胞：①静置后显微镜下观察细胞生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。②若细胞汇合度未超过80%，可去除培养瓶中旧液（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重新打入原培养瓶中），加入新的完全培养基6-8mL，放入培养箱中继续培养（若培养瓶为密封瓶盖须拧松瓶盖）。③若细胞汇合度超过80%，可进行传代处理（若因运输振动脱落的细胞需要离心回收），首次传代，建议1:2传代（1:2传代指传代至两个同等底面积的培养瓶/皿）。