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载基生物
▶ 实验流程


客户提供:
新鲜样本,取材时应马上置于液氮中速冻,-80℃保存,保存时间不宜过长,干冰运输。
固定组织用固定液保存常温运输即可,如有自发光应避光运输。
▶ 实验步骤
在样本托上滴加适量OCT包埋胶,将冰冻组织放在包埋胶上,再滴加少许包埋胶(胶的量以不流出样本托为准),按照取材顺序,然后置于冰冻机内速冻2分钟。
注意:
1、必要时待包埋胶凝固后用冰冻锤轻轻放在组织面上,不要用手压冰冻锤防止组织人为挤压变形;
2、组织太小时,需要预先在样本托上加包埋胶待凝固后再将组织均匀放胶上包埋(注意:甲状腺、脑、淋巴结、卵巢肿瘤等,待组织面的包埋胶呈半透明时,即将样本托从冷冻台上取下,将样本托夹在切片机的夹头上,待其继续冷冻;若为一般的肿瘤组织,组织面上的包埋胶发白后即可切片;若组织块中含脂肪组织较多,打开冰冻制片机雪花按钮开启低温速冻,压放卷板厚切)。
3、载玻片和样本袋的准备
在组织速冻的过程中,准备载玻片(室温放置)和样本袋(冰切机内放置)写上与样品管(袋)一致的信息。
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文献和实验正所谓“九层之台,起于垒土”,同样,要想拿到优秀的空间转录组实验结果,样本制备也是至关重要的!目前10x Genomics推出的Visium空间基因表达解决方案,支持新鲜/冷冻切片,优化升级后还可以支持FFPE样本,甚至结合免疫荧光染色。今天小编着重为大家介绍一下Visium 空间基因表达解决方案样本冰冻包埋的那些事儿! Visium 空间基因表达解决方案支持的样本类型 目前,10x Genomics官网已经测试过的组织类型包括: 人类:心脏,肾脏(正常和肾炎),卵巢,乳腺
准备工作:干冰(粉末状),OCT(冰上预冷 30min 以上) 1. 在包埋模具上好做方向标记,用于确定切片方向; 2. 于包埋模具中加入 1/3 或更多的 OCT; 3. 修剪组织,用吸水纸吸去组织表面血液或组织液; 4. 将组织放入挤有 OCT 的包埋模具中,调整好位置; 5. 往包埋模具继续加入预冷的 OCT,完全覆盖组织; 6. 将包埋模具置于干冰上,盖上干冰盒盖子,或敞开放入-80℃冰箱速冻; 7. 待组织块变白后,包埋完成,可连同包埋模具一同保存运输。 注意事项: 1. 组织
免疫电镜技术的染色方法 免疫 电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参考本书第四章,这里仅介绍免疫电镜的几种染色方法,包括包埋前染色、包埋后染色和冰冻超薄切片免疫染色三种。 1.包埋前染色 包埋前染色即在进行常规电镜包埋处理前先行免疫组织化学染色,然后于解剖显微镜下将免疫反应阳性部位取出,修成2~4mm3大小的组织块,再按常规电镜方法处理,包括戊二醛的再固定、锇酸后固定、脱水、包埋、超薄切片和电镜观察等。如果特三性免疫
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