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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
9999
- 英文名:
Hi-throughput dUTP qPCR Mix Master Mix
- 供应商:
北京迈迪安生物科技有限公司
- 保存条件:
-20
高通量 dUTP qPCR 预混液
高通量 dUTP qPCR 预混液 (MDX031)是一种快速、高度可重复的实时 PCR 主混合物,其采用高度优化的缓冲化学和热启动 DNA 聚合酶设计,可提供出色的结果和非常低的背景,从而实现更高的灵敏度。高通量 dUTP qPCR 混合液含有 Taq DNA 聚合酶、反应缓冲液、dNTP、MgCl 2、稳定剂和 PCR 增强剂。然而,dNTP 混合液中的部分 dTTP 已被 dUTP 取代,因此可以添加尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDGase) (MDX054) 来消除 qPCR 残留污染。这使得高通量 dUTP qPCR 成为在开放式、自动化、高通量仪器上进行多重检测的理想选择。
产品亮点
DNA病毒的高效性和灵敏度

使用高通量 dUTP qPCR 预混液以及细小病毒 B19 的引物和探针,对灭活粗病毒裂解物中 10 倍梯度稀释的细小病毒 B19 进行扩增。扩增曲线显示了四次重复,证明了高通量 dUTP qPCR 预混液的可重复性、效率和灵敏度。
产品规格
| 描述 | qPCR 混合物含有 Taq 聚合酶、反应缓冲液、dNTP/dUTP 混合物和 MgCl 2,可去除背景 PCR 产物污染。 |
| 浓度 | 2 x |
| 外观 | 澄清无色溶液 |
| 热启动 | 抗体介导 |
| 应用 | 高通量qPCR |
| 样品类型 | 互补DNA(cDNA) |
| 一致性 | 测试样品与参考样品之间有±0.5 Ct差异 |
| DNase/RNase污染 | PCR 扩增中未检测到任何痕迹,且与大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特定目标的阴性对照有重叠。 |
| DNase污染 | 没有可检测到的降解 |
常见问题解答:高通量 dUTP qPCR 预混液
什么是残留 qPCR 污染?
由于qPCR可以扩增微量DNA,因此防止污染至关重要,因为即使是少量的qPCR污染也可能导致假阳性。交叉qPCR污染可能包括来自其他样本的交叉污染、来自实验室其他地方的污染,以及来自先前qPCR实验中使用的扩增产物和引物的残留qPCR污染。后者是qPCR中大多数假阳性结果的根源。防止污染可能很困难,因此必须制定实验室规程,以确保一次检测中的DNA不会在后续检测中再次扩增。
尿嘧啶 DNA 糖基化酶如何在 qPCR 中使用?
尿嘧啶DNA糖基化酶可以特异性地降解已完成qPCR反应并掺入dUTP的产物,使用于扩增的天然核酸模板保持完整。尿嘧啶DNA糖基化酶的活化是qPCR的第一步,在50°C下孵育2分钟;在热启动活化过程中,当温度升至95°C时,尿嘧啶DNA糖基化酶变性。
UDG 和 UNG 有什么区别?
尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG或UDGase)是一个包含六个亚家族的酶家族。家族I的UDGase酶被称为UNG(尿嘧啶-N-糖基化酶基因),因此两者之间没有区别。UDG和UNG这两个术语通常可以互换使用,因为它们在qPCR中具有相同的功能——即防止qPCR残留污染。
为什么 dUTP 不用于所有 qPCR 检测?
使用该技术并非总能完全消除污染物,尤其是在PCR产物长度较短的情况下,而这在qPCR检测中很常见。此外,当初始样本仅包含一个或几个目标分子时,加入UDG可能会降低扩增效率,从而延迟检测,最终降低灵敏度。
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