- ¥1899.90 - 8339.90
- 阿拉丁
- 上海
- A743824
- 2026年05月09日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
A743824-1ml/A743824-5ml
| 规格： | A743824-1ml | 产品价格： | ¥1899.90 |
|---|---|---|---|
| 规格： | A743824-5ml | 产品价格： | ¥8339.90 |
基本描述
产品名称：Anti-c-Myc 亲和层析介质
规格或纯度：BioReagent, 50% v/v
应用：IP, Protein purification
产品介绍：
本产品可以检测原核、真核表达的c-Myc标签融合蛋白。c-Myc多肽是由人类染色体8q24上的c-Myc基因编码，对应于人类P62的410-419（EQKLISEEDL）氨基酸。Anti-c-Myc 亲和层析介质可以识别C端，N端或内部c-Myc标签蛋白融合蛋白，可应用在Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中, 用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达。
阿拉丁Anti-c-Myc 亲和层析介质储存在含0.1% ProClin 300的保护液中，凝胶和保护液的体积比为1:1，我司产品规格为实际凝胶的体积。
| 参数 | 指标 |
| 基质 | 4%琼脂糖微球 |
| 配基 | Anti-c-Myc 人单克隆抗体 |
| 粒径范围 | 45~165 μm |
| 结合能力 | ~1mg c-Myc 标签蛋白/mL介质 |
| 最大压力 | 0.1 MPa，1 bar |
| 储存 | 0.1% ProClin 300，2~8℃ |
| 保质期 | 2年 |
使用说明
1、样品准备
上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值，可以用平衡液对样品或细胞培养液稀释，或者用平衡液透析。
样品在上样前建议离心或用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
2、缓冲液的准备
所用水和缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
平衡/洗杂液：50mM Tris，0.15M NaCl，pH7.4
酸性洗脱液：0.1M glycine HCl，pH3.0
竞争性洗脱液：50mM Tris，0.15M NaCl，100-500μg c-Myc多肽/mL，pH7.4
中和液：1M Tris-HCl，pH8.0
3、样品纯化
3.1 柱层析
(1) 将Anti-c-Myc 亲和层析介质装入合适的层析柱，用5倍柱体积的平衡液进行平衡，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下。
(2) 将样品加到平衡好的Anti-c-Myc 亲和层析介质中，收集流出液，可以反复上样增加结合效率。
(3) 用10-50倍柱体积的洗杂液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
(4) 样品洗脱
A 酸性洗脱：使用5倍柱体积的酸性洗脱液洗脱，向洗脱组分中加入洗脱体积十分之一的中和液，调节pH值至7.0-8.0，分管收集。
注：酸性洗脱后填料要立即用平衡液平衡，Anti-c-Myc 亲和层析介质在洗脱液中不要超过20min。
B 竞争性洗脱：使用5倍柱体积的竞争性洗脱液洗脱。分管收集。
(5) 使用3倍柱体积的洗脱液再生，然后用平衡液平衡至中性。
(6) 然后保存在储存缓冲液中，2-8℃保存。
3.2 静态吸附
(1) 填料准备：取适量的Anti-c-Myc 亲和层析介质加入层析柱中，流干保护液。加入5倍柱体积的平衡液清洗。
(2) 加入样品溶液，4℃或室温震荡孵育至少30min (不能磁力搅拌)，确保填料与样品溶液充分混合。
(3) 孵育完毕后，将填料混合液离心（5000×g离心1min）或过滤收集填料。
(4) 将填料装入层析柱中，用平衡液清洗直至紫外稳定。
(5) 用酸性洗脱液或竞争性洗脱液洗脱，参考3.1 中(4)。
(6) 填料再生和保存参考3.1中(5)和(6)。
3.3 免疫沉淀操作流程
(1) 填料准备：取40µL的Anti-c-Myc 亲和层析介质 (柱体积20µL) 混合液加入到1.5mL离心管中，5000×g离心1min，吸弃上清。
(2) 填料平衡：加入0.5mL平衡液，悬浮填料（使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用），5000×g离心1min，吸弃上清。重复一次。
(3) 样品结合：加入200-1000µL样品裂解液或细胞抽提物到处理好的填料中，混合均匀，在室温下置于混合仪轻轻翻转离心管，促使样品 和填料充分接触并吸附，室温至少1h。5000×g离心1min，吸弃上清。
(4) 洗杂：加入0.5mL的洗杂液，悬浮填料，轻轻混匀，5000×g离心1min，吸弃上清。再重复三次。确保去除非特异性吸附。
(5) 样品洗脱：可根据后期检测的需要选择不同的洗脱方法。
A 酸性洗脱：加入100µL酸性洗脱液，悬浮填料。室温孵育5min，5000×g离心1min。小心取出上清，不要吸到填料，用中和液中和。洗脱样品放置 4℃，长时间放置-20℃保存。
B 竞争性洗脱：加入100µL竞争性洗脱液洗脱。室温孵育30min，5000×g离心1min。小心取出上清，不要吸到填料。洗脱样品放置4℃，长时间放置-20℃ 保存。
C 变性洗脱：实验室常规蛋白上样缓冲液（Loading Buffer）中含有β-巯基乙醇和DTT，可以使填料中抗体重链和轻链断开。含有SDS的样品缓冲液可以使Anti-c-Myc 抗体变性，洗脱后的Anti-c-Myc 亲和层析介质没办法重复使用。
每管中加入20µL 2×Loading Buffer，95℃加热5min。5000×g离心1 min，吸取上清SDS-PAGE电泳检测。
问题及解决方案
级别：BioReagent
产品规格参数
储存缓冲液：Buffer contains 0.1% ProClin 300
浓度：50% v/v
储存条件：2-8°C储存,禁止冷冻
运输条件：低温运输,禁止冷冻
稳定性与储存：Store at 2-8℃ long term (24 months). Do not freeze.
功能和特点
图片
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文献和实验【参考值】 凝血酶原：83%～127% 因子V：50%～150% 因子VII：65%～135% 因子X：45%～155% 【临床意义】 将病人血浆分别与测定凝血酶原基质血浆（人工制备凝血酶原血浆），测定因子V用的基质血浆（储存血浆或先天性因子V缺乏症患者血浆，凝血酶原时间测定应>1分钟），测定因子VII用的基质血浆（先天性因子VII缺乏症患者的血浆。基质血浆也可采用先天性因子VII缺乏症患者血浆与正常人硫酸钡吸附血浆等量混合），测定因子X
may be used. • Reduction of the polarity of the elution buffer byaddition of dioxane (up to 10%) or ethylene glycol (up to 50%) may be used for elution of bound substances. • Use of deforming agents like urea or guanidine hydrochloride
and sterilize them by autoclaving for 20 minutes at 15 psi (1.05 kg/cm2 ) on liquid cycle. Store the buffer at room temperature. TBS containing 0.2% (w/v) sodium azide Triton X-100
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