feulgen 富尔根染色实验检测

feulgen 富尔根染色实验检测

服务介绍：富尔根染色是一种用于检测细胞核DNA的经典组织化学染色方法，由Robert Feulgen和Heinrich Rossenbeck于1924年开发。该染色法特异性强，主要用于DNA的定位和定量分析。

染色原理：Feulgen染色法是一种用于显示和定量测定DNA的细胞学实验方法。该方法利用DNA在稀盐酸水解后产生的醛基与Schiff试剂（席夫试剂）反应，形成紫红色的化合物，从而显示出DNA的分布。

实验步骤：

1、脱蜡和水化：将石蜡切片置于二甲苯中脱蜡，2次，每次5-10分钟。用梯度乙醇（100%、95%、80%、70%）逐步水化，每步2-3分钟。最后用蒸馏水冲洗切片。

2、水解：将切片浸入预热至60°C的1N HCl中，水解5-10分钟（时间需优化，通常为8分钟）。

水解后，用蒸馏水冲洗切片。

3、希夫试剂染色：

将切片浸入希夫试剂中，室温避光染色30-60分钟。染色后，用亚硫酸水溶液漂洗切片2-3次，每次2分钟，以去除未结合的希夫试剂。

4、水洗：用流动自来水冲洗切片5-10分钟，去除残留的亚硫酸水溶液。

5、脱水：用梯度乙醇（70%、80%、95%、100%）逐步脱水，每步2-3分钟。

6、透明：将切片浸入二甲苯中透明，2次，每次5分钟。

7、封片：用中性树胶封片，盖上盖玻片。

结果判读：

核DNA呈紫红色，细胞质和其他成分呈淡绿色

注意事项：

1、水解时间：水解时间需严格控制，过长或过短都会影响染色效果。

2、希夫试剂：希夫试剂需新鲜配制或妥善保存，避免失效。

3、避光：染色步骤需避光进行，防止希夫试剂分解。

4、对照设置：建议设置阳性和阴性对照，确保染色特异性。

仅供科研实验用，不做其他用途！