5-碘-2,4-二甲氧基嘧啶，52522-99-3，≥98%

Synthesis of Triazole‐Nucleoside Phosphoramidites and Their Use in Solid‐Phase Oligonucleotide Synthesis

Distilled triethylamine (TEA), ≥99% pure Ethyl 2‐bromoacetate, 98% (Sigma‐Aldrich, cat. no. 133973)

师弟问了我 25 个引物相关的问题

1.      引物是如何合成的？目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。 DNA 合成仪有很多种 , 主要都是由 ABI/PE 公司生产，而 Bioneer自行研制 的专利 384并行高通量 DNA合成仪， 可实现 99% 的高合成率。无论采用什么机器合成，合成的原理都相同，主要差别在于合成产率的高低，试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。亚磷酰胺三酯法合成 DNA 片段，具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将 DNA 固定在固相载体上完成

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作用力的差异。 5．分离参数 Ø分离度(resolution，R)――相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R＝。当W1＝W2时，R＝。当R＝1时，称为4σ分离，两峰基本分离，裸露峰面积为95.4%，内侧峰基重叠约2%。R＝1.5时，称为6σ分离，裸露峰面积为99.7%。R≥1.5称为完全分离。《中国药典》规定R应大于1.5。 Ø基本分离方程――分离度与三个色谱基本参数有如下关系： R＝×× 其中称为柱效项，为柱选择