IMAC/Chelating

IMAC Bestarose HP/FF、Chelating Bestarose FF均是未预先螯合金属离子的金属螯合亲和层析填料，可广泛应用 于分离提纯蛋白质和多肽。其原理是利用蛋白质中含有的组氨酸、半胱氨酸和色氨酸的侧链与多种过渡金属离子如 Cu2+ ，Zn2+ ，Ni 2+ ，Co2+ ，Fe3+ 的相互作用，从而达到分离纯化的目的。 IMAC Bestarose HP/FF 是由氨三乙酸(NTA) 偶联于琼脂糖而成，可以螯合金属离子的四价位，使螯合的金属离子更稳定，能耐受较高浓度的还原剂，物理和化学稳定性好，并具备特异性好、流速快的优点。 Chelating Bestarose FF是由亚氨基二乙酸(IDA)偶联到琼脂糖基架制成。

Chelating Bestarose FF填料的配基可提供 3个配位位点同金属离子螯合，同时提供三个离子键结合部位高亲和地纯化目的蛋白，而IMAC Bestarose FF/HP填料 提供4个配位位点同金属离子螯合，2个离子键结合部位纯化目的蛋白，也就是说相同的配基密度、相同金属离子条件 下Chelating Bestarose FF填料较IMAC Bestarose FF的亲和力要强，所有IMAC Bestarose FF填料中不能吸附的样品 可选择Chelating Bestarose FF进行结合，但同时IMAC Bestarose FF填料因为多一个金属离子鳖合位点，它结合金属 离子的强度更强，还可以同微量还原剂DTT及β-巯基乙醇兼容，因此，在纯化里重组组氨酸标签蛋白时应根据蛋白特点选择填料。