番红 0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红 O 结合呈现红色, 嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨 组织和骨组织区分开。
一、实验原理
番红O 是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。番红O 着色与阴离子的浓度近似成正比关系,间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时,软骨中的糖蛋白会释放出来,使基质成分分布不均匀,从而导致番红 O 淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红 O 染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合,不宜褪色。番红O-固绿染色的分化很关键,分化过度易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深。