猪白介素12(IL-12/P40)酶联免疫分析试剂盒

猪白介素12(IL-12/P40)酶联免疫分析试剂盒
Porcine Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA KIT
产品优势
公司销售的所有产品均配有产品说明、技术资料。我们拥有稳定的科研队伍、先进的实验设备。将针对您的应用需求，为您提供专门的服务。高品质的ELISA试剂盒让您的实验结果更具科学性、准确性、专业性。将节省您大量的时间和精力更好地投入到实验工作中。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪白介素12(IL-12/P40)表达。
将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入微生物化的目标抗体，将未结合的生物素抗体洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。
试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	阳性对照	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	阴性对照	0.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

标本要求
1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

实验所需自备试验器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

试剂盒操作步骤
A.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
B.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
C.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
D.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
E.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
F.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
G.温育：操作同3。
H.洗涤：操作同5。
I.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
J.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
K.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

猪白介素12(IL-12/P40)酶联免疫分析试剂盒仅供科研实验！
实验结果计算
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

实验时出现的问题描述及解决方案
问题描述：变异系数大
可能原因：加液不正确
相应对策：检查加液情况

问题描述：背景值高
可能原因：检测抗体的工作浓度
                 酶标版洗涤不完全
                 洗液有污染
相应对策：使用推荐的稀释倍数
                 重新阅读操作手册，保证清洗完全；如果用自动洗板机，请检查所有的出口是否有堵塞
                 配置新鲜的洗液
试剂盒性能：请向客服人员索要详细电子版说明书！
猪白介素12(IL-12/P40)酶联免疫分析试剂盒
产品保存温度：2-8℃
产品有效期：6个月