293F 人胚肾细胞-F克隆

293F（人胚肾细胞-F克隆）

产品编号：CL-469h

细胞特性

形态：上皮细胞样，悬浮生长

含量：>1x10⁶cells

规格：T25瓶x1（常温运输）/ 2mL冻存管x2（干冰运输）

用途：仅供科研使用

培养基及培养冻存条件准备

收货须知

收货当天发现异常，请在 24 小时内及时联系客服，逾期视为收货良好！

冻存管形式：收货后及时置于-80℃冰箱保存，若长时间不使用，应过夜转移至液氮。复苏时每管一次用完不得留存；

T25 形式：收货后于培养箱中静置 2-3h，再对细胞

进行常规操作。在无菌条件下，将原瓶培养液转移到离心管中，1000-1200rpm/min 离心 5～10 min 后重悬细胞，转移悬浮细胞到新的 T25 瓶中，补加完全培养基到 10mL，放入培养箱中培养。请严格按照本说明操作，否则造成细胞失活等情形，不予提供补发服务。

细胞复苏、传代、冻存操作

（一）细胞复苏

①　冻存管从液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速没入 37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以 1 分钟内全部溶解为宜；

②　在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有 9mL 完全培养基的离心管内，1000-1200rpm/min 离心 5 分钟，弃去上清液，用 1-2mL 完全培养基重悬细胞；

③　然后将细胞悬液加入到含有6-8mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱中竖立培养。

（二）细胞传代

①　离心法：收集细胞，1000rpm 条件下离心 5 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀，将细胞悬液按 1：2的比例分到新的含 8mL 培养基的 T25 瓶中。

②　半量换液法：培养瓶静置 5-10 分钟后，将上清培养基轻轻吸走一半，剩余留有细胞沉淀的培养基重悬混匀，细胞悬液按 1：2 的比例分到新的含 8mL 培养基的 T25 瓶中。

③　注意培养基 pH 值变化和细胞密度，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到大于 2×10⁶ 个/mL 时，重复传代操作或者冻存。

注意事项：

① 细胞具有密度依赖性，首次传代（密度达到 80%），建议 1:2 传代（保持细胞密度），且优先在 T25 瓶中；

② 密封培养瓶的话，处理完后放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松。