NOMO-1人白血病细胞丨STR鉴定正确

NOMO-1人白血病细胞(STR鉴定正确)

产品基本信息

细胞名称：NOMO-1人白血病细胞(STR鉴定正确)

种属来源：人

组织来源：血液

细胞形态：圆形细胞样

生长特性：悬浮生长

培养基:： RPMI-1640+10% FBS+PS

生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

传代方法：1:2至1:3，每周3次

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

支原体检测：无

细胞培养操作

1)复苏细胞：1.将含有1 mL NOMO-1细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。

2.在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。

3.然后将所有NOMO-1细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜)。

4.第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

方法一：收集NOMO-1细胞，1000RPM条件下离心3-5min分钟，弃去上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余NOMO-1细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106~1x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

注意事项

悬浮细胞收货注意事项：

1、收货时需镜下拍照(看密度、状态)

2、静置后需镜下拍照(看整体密度)

a.如密度50%以下，建议换液并竖瓶培养

b.如密度50%-80%，建议换液培养，隔天观察密度

c.如密度90%，建议传代

3、换液及传代处理前，培养瓶竖着放置至少半小时(使细胞沉到瓶底);收集上清，必须将瓶内所有培养基(70ml)全部收集!并用PBS(10ml)润洗瓶底并收集!离心转速为1000rpm，5min。

4.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

5.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。