【产品名称】 Fast DNA Library Plus Prep Kit 【货号/规格】 K004-A(24次);K004-B(96次);试用装(6次) 【产品简述】 本试剂盒针对 Illumina 高通量测序平台,提供了一管式便捷、通用的 DNA 文库构建方案,将片段化、末端补平和末端加 A 结合到一个步骤,大大缩短了建库的时间、减少了繁琐步骤造成的误差,片段化和末端修复后的产物可直接进行接头连接,不需额外纯化,后续操作和#K001 Fast DNA Library Prep Kit操作相同。完整的文库定量可将文库稀释至合适浓度,用双链 DNA 荧光染料方法(如Thermo Qubit Flex Fluorometer)或 qPCR 绝对定量方法。 【样本类型】 表 1 常用DNA推荐投入量
应用
样本类型
推荐投入量
全基因组测序
高质量复杂基因组
50ng-1μg
全外显子靶向捕获测序
高质量复杂基因组
10ng-1μg
全基因组靶向捕获测序
FFPE DNA
≥50ng
全基因组测序
微生物基因组
1ng-1μg
全基因组测序(PCR-free)
高质量 DNA
≥50ng(不分选) ≥200ng(分选)
推荐使用 TE 或超纯水溶解 DNA 样品,如样品中含有 EDTA,则需磁珠纯化或加入一定体积的 Neutralization Buffer 中和。 【储存条件及有效期】 所有试剂均应保存于-20℃,Ligation Buffer 在低温下会有晶体析出,属正常现象, 应平衡至室温后使用,产品有效期为 12 个月。 【组成成分】
组分
24 rxns
96 rxns
FEP Buffer
120μl
480μl
FEP Enzyme Mix
240μl
2×480μl
Fast DNA Ligase
120μl
2×240μl
Fast Ligation Buffer
600μl
4×600μl
2× HIFI Library PCR Master Mix
600μl
4×600μl
Primer Mix*
120μl
480μl
Neutralization Buffer
120μl
480μl
*FEP Buffer 为片段化、末端修复的反应 buffer,FEP Enzyme Mix 为片段化、末端修复相关酶混合物。 *若有多个样本,则推荐使用#K002 和#K003 接头引物组合,本试剂盒提供一套含 index 的引物。 备注:分选磁珠推荐使用#NC1011 GDSPure DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。