R1041可进行25次逆转录反应,R1042可进行50次逆转录反应(20 μl 标准 PCR 反应体系,每次使用 M-MLV 1μl)。 M-MLV 储存液成分 20 mM Tris-HCl (pH 7.5),200 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.01% NP-40,50% glycerol 5xfirst-strand buffer 成分 250 mM Tris-HCl (pH 8.3 at 25℃),375 mM KCl,15 mM MgCl2,50 mM DTT
保存条件 -20℃保存,避免反复冻融。
质量检测 逆转录酶活性检测 使用[32P]dCTP作为标记,200 U的M-MLV以1μg、1.2 kb的RNA为模板进行逆转录反应,最低可得到120 ng的cDNA,所得cDNA长度 > 全长的90%。 核酸外切酶活性检测 混合50 ng的标记DNA或RNA与200 U M-MLV在1×反应缓冲液体系中,37℃温浴1 h,检测DNA和RNA降解都不到总量的1%。 核酸内切酶活性检测 混合1μgⅠ型超螺旋质粒DNA与500 U M-MLV在1×反应缓冲液体系中,37℃温浴1 h,琼脂糖电泳检测,无明显的剪切。