外泌体提取纯化试剂盒（血清-血浆）升级版-20T

★产品名称：外泌体提取纯化试剂盒（血清-血浆）升级版

★产品用途：适用于血清血浆（血浆优先选该试剂盒），可以提取20ml 为UR52136升级版

★目录价格：2400；产品货期：现货；

★产品货号：UR52151；产品规格：20 T；

★保存方式：Solution A 常温18-25℃（实验前-18℃保存）；Solution B 常温18-25℃；运输条件：常温

产品描述：

外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能，在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子，然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。

外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒，而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。宇玫博生物自主开发的外泌体提取纯化试剂盒，组分经过优化处理，适用于血清、血浆中的外泌体提取，并搭配纯化过滤装置，可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒，可用于电镜分析、NTA粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。

产品组成：

* Nuclease-free, Sterile

产品优势：

涵盖组织、细胞上清、血清血浆、乳液、尿液以及其他体液等多种样本；

针对不同样本，预处理、提取、纯化试剂做差异化配方；

样品处理量大，可达同类产品5倍以上；

外泌体可用于细胞共孵育和组学研究；

专注于外泌体提取和配套试剂盒研发；

价格便宜，为您大规模研究节省成本；

数百篇参考文献让您放心使用无忧购；

质控数据：

牛奶                                    细胞上清                                  血清

操作视频：

包含了丰富全面的教学视频，教你快速获取和提纯外泌体。除了血液、血液、尿液等外泌体提取纯化操作视频教学外，还提供了超滤浓缩、 MSC 培养、肿瘤/T 细胞培养操作视频！

操作规程：

一、 样品预处理

1、 离心机在使用前先于4℃预冷10 min；

2、 取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后于25℃水浴中进行解冻，将完全融化后的样品置于冰上，如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上；

3、 将样品按照500 μL每管进行分装，不足部分用1×PBS补足至500 μL；

4、 离心去细胞碎片：将样品转移至1.5 mL离心管中，于4℃以3,000 ×g（~6,200 rpm*）离心10 min，去除样品中的细胞碎片（注：若沉淀较多，可3,000 ×g，10 min离心多次至无明显沉淀，每次取离心上清液）；

*为约7 cm有效离心半径的小离心机换算（≤2 mL离心管），下同。

5、 离心去杂质碎片：将离心上清液转移至新的离心管中，于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心10 min，去除样品中的杂质碎片；

6、 上清液转移：去除杂质碎片的上清液转移到新离心管中。

二、 去除杂蛋白

1、 加Solution A：在500 μL血液样品中加入400 μL预冷的Solution A，立即将离心管盖紧，通过涡旋振荡器充分混匀30 s；

2、 离心去蛋白：将混匀后的样品于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心20 min，去除样品中的杂蛋白；

3、 上清液转移：去除杂蛋白的离心上清液转移至新的1.5 mL离心管中。

三、 提取外泌体

1、 加Solution B：在去除杂蛋白的离心上清液中加入120 μL的Solution B；

2、 溶液混合：加入Solution B试剂后将离心管盖紧，通过涡旋振荡器混匀1 min，再放置于4℃静置30 min以上（注：增加静置时间可提高外泌体得率，但不可超过24 h）；

3、 沉淀外泌体：取出装有混合液的离心管于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心15 min，弃上清，沉淀中富含外泌体颗粒（尽可能吸尽上清液）；

4、 再次离心：将含有沉淀的离心管再次于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心2 min，弃上清（注：尽可能吸尽上清液）；

5、 外泌体重悬：取合适量的1×PBS均匀吹打离心沉淀物，待其溶解后，将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中（建议每500 μL血清血浆用200 μL左右1×PBS重悬）；

6、 收获外泌体颗粒：将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心2 min，保留上清液，其中富含外泌体颗粒（注：若沉淀较多，可12,000 ×g，2 min离心多次至无明显沉淀，每次取上清液）。

四、 纯化外泌体

1、 纯化外泌体：将收获的外泌体颗粒粗品转入Exosome Purification Filter（EPF柱）上室中，于4℃以3,000 ×g（~6,200 rpm）离心10 min，离心后收集EPF柱管底的液体，此液体即为纯化后的外泌体颗粒（注：EPF柱不可重复使用）；

2、 外泌体的保存：纯化后的外泌体以合适体积进行分装冻存于-80℃低温冰箱中，以备后续实验使用。

QA

1、如何选择血清和血浆样本来进行外泌体研究？

答：血清和血浆都是常见的外泌体样本来源。由于血液在凝血过程中血小板会受到刺激会产生大量外泌体，因此若需要排除血小板外泌体的影响应采用血浆进行外泌体提取检测。

2、出现溶血现象的血清/血浆样本对外泌体提取有什么影响？

答：破碎的细胞会释放一些杂质影响下游实验，尤其是电镜鉴定。溶血样品里的外泌体也会降解。溶血样品不建议用于外泌体提取。

 

3、试剂盒可以提取多少血清/血浆样本的外泌体？

答：UR52151/UR52150 试剂盒一共可以提取 20 个样本的外泌体，每个样本最大体积为1mL。建议使用 0.5mL 体系进行实验，在 EPF 柱纯化外泌体阶段再进行样本合并。

经典案例：