xiaxuehua
发表于 2009-07-28 21:03
我做过蛋白的纯化,透析也是常做的。我觉得上面的一些朋友说得太理论了。楼主刚接触蛋白纯化,用的是透析袋吧。
根据我的经验,想完全把蛋白里的盐分透掉不可能,而且蛋白在透析的过程中多少会损失一部分,所以我觉得如果你的蛋白很珍贵,就不用非透得很干净,否则适得其反,经常换超纯水倒是很重要的,一般透个24小时-48小时足够了。要加满水,充分浸泡。
蛋白如果含盐量高,冻干后往往含有结晶样的物质比较多,而蛋白如果含盐量低,则冻干后往往成棉絮状,这从表观上有助于你判断透析效果,或者你可以取一些蛋白,溶解后测蛋白质质量百分数,剩下的基本就是盐含量了。
提醒你一下:
透析袋不能太小,否则透析后可能会胀破袋子,那就惨了。
太大也不好,容易让蛋白残留在袋内,记得最好用移液器加蛋白,取蛋白,这样能最大限度节约蛋白。