取大鼠肝脏做RT-PCR,是否需要对大鼠肝脏进行灌洗处理?
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sshssh
发表于 2003-01-08 20:19
取大鼠肝脏做RT-PCR,是否需要对大鼠肝脏进行灌洗处理?
可以不灌洗,但是一般用DEPC处理过的PBS漂洗,尽量滤干水分,液氮速冻-80保存或直接提取。
RT和PCR时的引物设计是不是一定要先知道目的基因的序列?必须 在RT时,引物设计有3种方法即
a:Random 9mers;
b:Oligo dT-Adaptor Primer;
c:特异的下游引物。如果用a和b方法,是扩增的所有的cDNA(理论上),还要用此产物做PCR 的模板继续扩增。