DarrenWONG
发表于 2006-12-22 18:20
lipofectamine2000对血清并不十分敏感,说明书上有说的。
楼上的兄弟说的是,可以在铺板时换成没有ps的有血清培养基,转染时再用空白的培养基(或者Optim)洗洗就行了。
还有,liujunniao1983的步骤中好像转了两个东西,还含SV40DNA,其实更多的情况下,只要转一个或者共转染(共转的DNA都是放在一起算的),请看我在网上找到的一个步骤,还是比较通用的。
至于铺板密度的话,也要看你是做瞬转还是稳转。前者可以密度高一点,80-90%都可以,后者的话,可以适当降低一点。
还有一点不知当讲不当讲,对于用六孔板和12孔板转染,我个人认为可以适当降低Lipo的用量,一来省试剂,怎么说750uL Lipo也是两千多块啊,二来细胞毒性也小。我在六孔板里转染一般都是按说明书减半的,没出过问题的。
希望对您的试验有帮助哈。