这是我在一篇文献中看的免疫共沉淀的图,验证EDR1与EDR4的互作,不理解电泳跑出来的条带和对应分子量的关系。
从图片可以看出EDR1和EDR4相互作用。input是证明可以表达,这也是后面实验的前提。免疫共沉淀一般是两部分,第一步是沉淀下一种蛋白,然后再这样的基础上沉淀另一种,只有两个蛋白相互作用才能同时被沉淀下来。这里的flag和GFP都是标签,选择不一样的标签也是为了可以用两种不一样的抗体分别沉淀。从上往下数第二排可以看到在EDR1已经被沉淀下来,在这个基础上用GFP抗体,看到只有130KD的被拉下来了,这是和EDR4结合GFP,而单独的GFP(25KD)的并没有被拉下来。所以很明显可以看出这两种蛋白之间存在互作。
input是验证两种标签的存在
请问input是啥意思呢,是不是细胞裂解后直接跑的电泳检测看有没有这两种蛋白,这时候还没有做磁珠抗体是吧?
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