WB条带上出现类似气泡的东西,求助

WB条带上出现类似气泡的东西,求助

木水姑娘 15 评论 293 阅读

我按照正常的方法做出条带,做的是52K的条带,按理说应该是很漂亮的,做出来如下,我就是想知道这到底是为什么。。。。都不知道怎么改条件了来改善了

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15 条评论
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  • tao0129 2013-02-25  5

    配胶用玻璃板和边条应及时洗净。玻板未洗净的坏处很多:1.  尽管玻璃看似平滑,但是一些细微的凹陷处会凝结肉眼无法分辨的胶颗粒(摸上去疙疙瘩瘩),其坏处是,在该部位极易导致不均匀的胶块,样品经过该处或电泳散热不好,条带变形。2.  如果是RNA的超薄胶,胶板的颗粒会导致局部巨大气泡,非常难于清除;蛋白胶也会导致一些小气泡的产生。3.  玻板没洗净的另一个坏处是,由中学物理知识可知,玻璃表面越光滑粘附越牢,未洗净的玻板会削弱和胶体间的粘附力,拔梳子或边条时会产生微小的错动,胶体下部出现大量气泡(夹在玻板和胶之间,这个关系不大);严重的错动会使上样时,样品从胶和玻璃之间的间隙漏光,或者甚至胶和玻板分开。4.  为避免拔梳子时的错动,可在电泳缓冲液中拔梳子(比水更好,有SDS润滑)。

  • wuhao88 2013-08-15  1

    1、最可能是转膜时胶和膜之间的气泡没有赶净,正好落在了目的蛋白处,导致蛋白没有转移到膜上2、其次可能是荧光淬灭,产生了空泡

  • U平台 2019-03-04  0

    转膜的时候在胶和膜接触的面有气泡。在转膜的时候可以先加转膜缓冲液将膜润湿,胶和膜放好后可以用玻璃棒轻轻擀几下,就可以减少胶和膜之间的气泡。特别是在你需要的蛋白条带附近一定要细心检查

  • xxfn 2015-09-17  0

    WB最忌讳气泡了,气泡导致胶和膜表面产生距离,蛋白转不到膜上

  • jqkahi 2013-08-22  0

    最可能是转印过程中,有气泡

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