Western Blot的条带

Western Blot的条带

歪歪不倒翁 14 评论 679 阅读

我是western初学者,最近做试验总是出现加样后样品不浓缩,向两边扩散的现象,我的缓冲液和配胶的试剂应该都是没问题的,因为有个师姐同时做没出现这个情况,请教一下,万分感谢

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14 条评论
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  • larixa 2013-07-15  11

    你的胶是失败的,胶的比例有无问题,微波炉加热是否充分,趁热倒胶时是否均匀,冷却凝结时是否静置,冷却时间是否足够。都可能出现小问题。从你的叙述来看,你的胶可能不止一处存在问题。先不要浪费你的样品,先研究一下怎样做出能用的凝胶。

  • lzp126 2013-10-15  7

    样品向两边扩散是因为在电压作用下蛋白向下跑 自身阻力导致样品上面和下面受力不均 样品孔旁边是空的话就会倾向于从旁边阻力小的孔扩散 跑胶时在样品两边的空孔加上等量的上样缓冲液就行了

  • 凝胶的质量非常重要,聚合收缩时间是否够?各组分是否充分混匀?

  • 建议初学者,购买固定公司的凝胶试剂盒和上样缓冲液,自己配置的有时候会出现比例不对,导致后续实验失败,你们目的是完成实验得到结果,虽然试剂盒贵了点,但是一般不会出问题,而且同批次的比较稳定,先完成实验得到结果,再回头研究为什么,这样两不误,实际上制造样本的价值远远高于试剂盒多出来的那些钱!我没说错吧!

  • 是不是配浓缩胶的时候混匀不均匀,以前出现过这个问题,混匀后就解决了。

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