PCR无结果,只有引物二聚体 提取细菌基因组,之后PCR,凝胶检测之后只有引物二聚体。PCR反应体系:rTaq 酶 0.25 PCR buffer 5 dNTPs 4 基因组DNA 5 引物各2 ddH2O up to 50 单位均为微升 PCR 条件: 94℃10min followed by 30 cycles of (94℃ 30s ,50℃ 30s ,72℃ 1 min) 72 ℃ 10min。引物Tm 56.7,目的片段长1315bp。
你的退火温度有点低,你的延伸时间最好在90s
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