标签: 菌落 PCR
菌落PCR可用于:(1)重组体的筛选;(2)重组体DNA测序分析。
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直接挑取菌落进行PCR,PCR的95℃加热可以破胞,释放基因组DNA或质粒,成为PCR体系的模板,然后进行链式扩增。
PCR无结果,只有引物二聚体
PCR无结果,只有引物二聚体 提取细菌基因组,之后PCR,凝胶检测之后只有引物二聚体。PCR反应体系:rTaq 酶 0.25 PCR buffer 5 dNTPs 4 基因组DNA 5 引物各2 ddH2O up to 50 单位均为微升 PCR 条件: 94℃10min followed by 30 cycles of (94℃ 30s ,50℃ 30s ,72℃ 1 min) 72 ℃ 10min。引物Tm 56.7,目的片段长1315bp。
1 评论
质粒验证
质粒提取可以验证阳性克隆吗?不做菌液PCR,只提取质粒验证,然后送去测序!
菌液pcr用rtaq与extaq酶的结果是否有差异
如题,T克隆時用了extaq的pcr体系,最后在菌液pcr時也使用了extaq酶进行的pcr,但是网上资料说extaq的保证性高,会出现假阳性,不推荐用,但是不想重新用rtaq重复,只想知道extaq的pcr结果能否可信
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