我来回答  

我现在在做原核表达,表达条件应该没有问题,我们做过各种条件的摸索,还是多数以包涵体形式存在。我们的目的蛋白分子量小于GST标签蛋白,是不是这个原因导致的?谢谢!!

bylvjing  提问于 2013-04-01

共6个答案

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    detaibio 回答于 2015-11-11

    原核蛋白表达与纯化实验所表达的目的蛋白大多数是以包涵体的形式表现,有些蛋白可以通过降低温度,加快实验速度来改变表达情况,使蛋白表达为可溶性上清蛋白,但是最有效的还是做包涵体复性,这是比较稳妥的,可获得可溶性蛋白的方法,只是活性上会有所降低。  

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    dididada 回答于 2013-10-21

    目的蛋白是否以包涵体表达:主要与目的蛋白本身的性质有关。
    如果二硫键较多,基本上用什么标签都不行,只能以包涵体表达。
      

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    makelong210 回答于 2013-08-22

    原核表达系统的蛋白大多是包涵体的,不否认这个因素。  

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    xxfn 回答于 2015-09-11

    包涵体不是摸索温度,IPTG这些条件可以改变的,从蛋白序列入手,蛋白序列本身就不适在原核中表达,没有优化序列,哺乳在真核表达蛋白了,有活性,而且没有包涵体,关于包涵体的资料可以看一下http://www.detaibio.com/material-downloads.html
    而且真核表达瞬时表达蛋白也很快的,不比原核慢
      

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    bssci 回答于 2015-06-28

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    shashababy 回答于 2013-04-03

     降低IPTG浓度是没有用的,不过降低温度,将至18度最低可以。
      

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