我设计引物两端带有酶切为点,PCR扩增的片段,通过这两个酶切为点酶切然后连接到相应酶切的载体上,调转化子后还是用这两个引物去PCR做鉴定不知道是不是可以呢?还有PCR产物是不是可以直接连到相应的载体上?
1. 克隆产物应该用载体两端含有的引物进行鉴定。2. PCR产物是否可以直接连接到相应载体,要看你PCR用的什么酶。3. 用Taq酶的产物末端自动加A,为黏性末端,可以直接连接;如果是用高保真酶,产物是平末端,必须进行磷酸化或者末端加A才能连接。
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