我在做人的肌肉组织神经肌肉接头部位的直接免疫荧光,观察末梢神经和终板形态。取新鲜组织,4%多甲固定,蔗糖脱水,OCT包埋,冰冻切片机切片,35um,用两种本身自带荧光的试剂,一种染末梢神经,在激光共聚焦显微镜下显绿色,而且绿色一直显色很好,另外一种是invitrogen公司的α-Bungarotoxin, Alexa Fluor® 555 Conjugate, 与运动终板上的乙酰胆碱受体结合 镜下应该显红色,但是红色一直 都染不出来,不知道是什么原因,用α-Bungarotoxin染终板时,试过室温40分钟,4度过夜,破膜剂也用了,封片也是抗荧光淬灭剂封片,但红色就是一直出不来,镜下只看到暗红色的一片背景,请教各位,有谁做过这方面的,指导一下,不甚感激,附照片。前面两张图片 中间椭圆形膨胀的部位是不是运动终板呢?第三张图片是肌纤维的图像,可对比看。 中
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