我用血清标本做PCR-RFLP,按照文献合成了引物,一对引物的PCR产物电泳跑出50bp,应该是引物二聚体,其他两对引物的PCR产物分别是400bp和220bp,条带比较清晰,但是和文献报道不符,请问是怎么回事啊?该如何处理? 急求答案!感激中......
不知道你的目的条带是多大?PCR出现问题是很正常的,一般的解决办法是:(1)摸索PCR条件,优化模板浓度,温度梯度等;(2)重新设计引物。
1. 引物序列blast,看是否存在非特异性。很多文献并不很可信。2. 如果十分想知道扩增出的片段内容。切胶回收后,送测序。而后比对该序列的来源。
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