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PCR后用紫外分光测定DNA含量都在450-500ug/ul,但电泳无目的片段的条带,内参也没条带。电泳中maker能跑出条带,用引物也点了样,引物的条带稍模糊但还是有,请问是哪里出了问题?

且行且乐  提问于 2013-09-21

共22个答案

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    alaling 回答于 2018-11-28

    1,marker和引物有条带,说明在跑胶的环节应该没什么问题
    2.内参和目的条带均没有,说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题,就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题
    3.你说电泳无目的片段的条带,是指有其它非特异条带还是根本就没有条带?如果可以,放上图是最好的,大家都可以一目了然,比这里做排除法强的多
      

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    dxy_iwqdsrj 回答于 2018-12-06

    1,marker和引物有条带,说明在跑胶的环节应该没什么问题2.内参和目的条带均没有,说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题,就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题  

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    dxy_lr95ba4e 回答于 2018-11-19

    test  

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    dxy_936yq74e 回答于 2018-11-16

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    yanghai-suda 回答于 2018-10-30

    和其他人意见一样,就是你PCR反应出问题了,PCR没有扩增出目的条带,很简单,重新调整PCR参数,重新PCR  

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    AQ_Bio_Z 回答于 2018-10-30

    用紫外测浓度不能评判你PCR的成败。你用自来水去测一下,说不定也有一定数值。应该是PCR的过程有问题,导致没有扩增出来。  

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    厦门易百泰 回答于 2018-10-30

    用紫外分光测定DNA含量,其实是测溶液的浊度,并不确定是DNA。做这个测定需要做对照的。


      

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    九夏宿诺 回答于 2018-10-16

    都木有看到浓度单位应该是ug/ml吗?  

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    boshiSCI 回答于 2018-11-16

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    角色转换之间 回答于 2018-10-30

    你的实验条件不是最优的,还是PCR扩增的特异性太差的原因吧,可以看看一篇资料:PCR问题解决与分析和提高PCR特异性的方法,或者扩增建议使用热启动Taq聚合酶扩增吧,能够极大程度的提高特异性  

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    chloemica 回答于 2018-10-16

    请问光度计呢?-chloe  

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    bssci 回答于 2018-10-16

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    不高兴233 回答于 2018-10-30

    我们老师说还是以电泳结果为准,测浓度的那个即使有数据也不见得有产物  

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    童话天 回答于 2018-10-16

    对照组实验样品出现了吗?  

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    鼎鼎云菜 回答于 2018-10-16

    同上   希望能附上图  可以看得更加清楚点  

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    李武500 回答于 2018-10-16

    PCR产物一般没有那么高浓度的,一般是几个微克每微升就很不错了,你肯定是没测对,还有你Maker能跑出,说明你根本就没有P出来,在pcr上找原因吧  

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    2013qaz 回答于 2018-10-16

    啦啦啦 全新的预制胶出炉啦 各种浓度都有哦 独家专利配方哦 操作便捷 价格实惠  

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    majiage 回答于 2018-10-16

    vvvvvvvvvvv  

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    curiehxn 回答于 2018-10-16

    加EB了没有  

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    棉花糖1号 回答于 2018-10-30

    PCR的问题,内参都没有的话,应该就是PCR出了问题,体系出了问题,否则内参应该是要有的  

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