PCR后用紫外分光测定DNA含量都在450-500ug/ul,但电泳无目的片段的条带,内参也没条带。电泳中maker能跑出条带,用引物也点了样,引物的条带稍模糊但还是有,请问是哪里出了问题?
1,marker和引物有条带,说明在跑胶的环节应该没什么问题2.内参和目的条带均没有,说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题,就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题3.你说电泳无目的片段的条带,是指有其它非特异条带还是根本就没有条带?如果可以,放上图是最好的,大家都可以一目了然,比这里做排除法强的多
1,marker和引物有条带,说明在跑胶的环节应该没什么问题2.内参和目的条带均没有,说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题,就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题
用紫外测浓度不能评判你PCR的成败。你用自来水去测一下,说不定也有一定数值。应该是PCR的过程有问题,导致没有扩增出来。
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