标签: 外周血细胞 染色 计数
本实验主要用于血液常规检查。
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瑞氏染料中有美蓝和伊红两种成分,前者为碱性,后者为酸性,它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力,使其显现出不同的色调。血细胞核由去氧核糖核酸和强碱性的组蛋白、精蛋白等形成核蛋白。这种强碱性的物质与瑞氏染料中的酸性染料伊红有亲和力,所以染成红色;核蛋白中还有少量的 弱酸性蛋白,它们又与染液中的碱性染料美蓝起作用而染成蓝色,但含量太少,蓝色反应极弱 ,故核染色呈现紫红色。较幼稚的细胞之胞浆和细胞核之核仁中含有酸性物质,它们与染料中的碱性染料美蓝有亲和力,故染成蓝色。
1. 制作血涂片
(1)滴一小滴血(约5 ul)于干净玻片上,推片与玻片应呈约30°角,用力均匀而较快,且不可复推。
(2)如血滴较小,推得较慢,角度小于30°,所制涂片较薄。
(3)如血滴较大,推得较快,角度比30°大时,则所制涂片较厚。
2. 将标本放平(最好置于一个固定架上),用滴管将染液滴于涂片上,可用滴管将染液驱散,使其布满整个涂片。
3. 染液布满整个涂片后,稍等片刻或立即加入缓冲液,并使缓冲液与染液混均匀。
4. 染液与缓冲液的比例
(1)染液量要充足,否则染液很快蒸发,将染料沉淀于细胞上。
(2)染液与缓冲液的比例为1:2~4左右比较合适。
(3)稀释度越大,染色时间越长,细胞着色较好,反之则越差。
5. 染色时间:视具体情况而定,一般约需10~30分钟。
6. 冲洗:用自来水冲洗涂片上之染料。
7. 显微镜检查:待自然干燥后用光学显微镜检查。
1. 制作血涂片应避免气泡,厚度适中。
2. 染液与缓冲液的比例要适中。
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