基因插入位点和模式
在过去的 25 年里,转基因植株中外源基因插入模式和位点的研究,极大地有助于人们认识植物核基因组中外源基因的整合、表达和稳定遗传的机理。同时,分子鉴定对于转基因作物的安全评估也是一个必要的步骤。因此,本章主要介绍通过根癌农杆菌介导转化,或外源 DNA 直接转化方法所获得转基因禾谷类作物和牧草中,外源基因插入模式和位点数目的标准分析流程及鉴定方法。基因组中外源基因的数目和分布情况,主要通过遗传研究、PCR 和 Southern 分析相结合 ...
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植物体内可溶性糖含量的测定(蒽酮法)
不同载培条件,不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定,可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。
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植物体内可溶性蛋白含量的测定
LoWry法是双缩脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的结合与发展。LoWry法适于微量蛋白的测定,对多个样品同时测定较为方便。但对不溶性蛋白和膜结合蛋白必须进行预处理。
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RNA介导的基因沉默
通过转录后水平基因沉默(PTGS) 使内源基因下调表达是鉴定植物基因功能的一把钥匙。在植物、真菌和动物界不同的物种中已经发现许多基于 RNA 水平的沉默机制,如转录后水平基因沉默、共抑制、基因压制和 RNA 干扰(RNAi ) 。其中,RNAi是最令人感兴趣的发现之一。它是一种由双链 RNA ( dsRNA) 引发的、具有序列特异性的基因沉默机制,将与目的基因序列同源的双链 RNA 导入体内,可引起该基因编码的 mRNA 降解。用改造的病毒侵染植物也能诱导 RNA 沉默,称之为病 ...
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