支原体污染的特点及检验
最近看大家常提到支原体污染,就翻了翻书,做了些笔记,现在贴出来和大家分享:支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞 ...
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PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪器设备超净工作台、PCR仪、电泳仪、凝胶成像分析系统、台式离心机、旋涡混悬器等。2、实验试剂选 ...
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支原体培养
支原体常用培养基为PPLO很多公司都有出售.但血清(常用马血清或猪血清)和抗生素(醋酸跎)你要自己加.你可以查查.还有改良的Frey's培养基,常用的微生物实验技术书上都可以查到的.可以自己配制的.在液体培养基中通常要加入酚红做指示剂的,当培养基由红色变为黄色时,即可判定支原体的生长程度.要强调一点,支原体的分离可能不太容易,那么要多盲传几代.液体培养基变黄后,在固体培养基上单克隆, ...
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支原体培养的问与答
支原体问题一、简介:支原体的大小为 0.1~0.3um,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的麻烦。菌落小(直径 0.1-1.0 mm),在固体培养基表面呈特有的"油煎蛋"状。无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性,对渗透压敏感,对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。革兰氏染色不易着色,故常用 Giemsa 染色法将其染成淡紫色。细胞膜中胆固醇含量较多,约占 36%,对保持细胞膜的完整性具有一定作用。细胞膜含甾醇,比其他原核生物的膜更坚韧。凡能作用于 ...
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