【共享】免疫组化固定剂的选择
固定是免疫组化的第一步,很多人都忽视了这一步,认为用福尔马林就行,其实学问也挺大的用于免疫组织化学的固定剂种类较多,性能各异,在固定半稳定性抗原时,尤其重视固定剂的选择,介绍如下。 1.醛类固定剂 双功能交联剂,其作用是使组织之间相互交联,保存抗原于原位,其特点是对组织穿透性强,收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K链和λ链的标记效果良好,背景清晰,是常用的固定剂。 (1)10%钙-福尔马林液(浓甲醛10ml,饱和碳酸钙90 ...
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冰冻切片的免疫组化染色
1. 新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片( 也可- 80℃保存),厚度为 5~6μm。2. 载玻片可不打底,裱片后,立即用电吹风吹干。3. 如不马上染色,可密封后- 20℃保存。4. 染色前用冷丙酮在 4℃固定 10-20 分钟。5. PBS 洗 2 次,每次 5 分钟,( 必要时应用 0.1%柠檬酸钠+0.1%triton打孔)6. 3% H2O2灭活内源性过氧化物 ...
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石蜡切片免疫组织化学染色
石蜡切片免疫组织化学染色 1.烤片 烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上,以免染色过程中切片脱落。切片在56―60℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的,但是,通常的烤片温度为;8~60℃,时间为2―6小时。由于高温干燥可加速组织中抗原的氧化,因此高温烤片对抗原有破坏作用。 2.脱蜡和水化 分别在二甲苯I、Ⅱ中浸泡15~30分钟,以脱掉组织中的蜡。但是,进人组织中的 ...
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【求助】液氮冻存的组织能否用来做免疫组化
【求助】免疫组化参与者:andywfa我想请教一下,液氮冻存的组织,能否用来做免疫组化?叩谢了!参与者:organer当然可以,只要你冻存方法正确,冻存可以保护细胞,当然也可保护细胞表面抗原和组织抗原参与者:zgxsea液氮冻存组织一般用来提取蛋白、DNA或RNA,做相关指标的检测。如用其做免疫组化,存在一个技术性难题,即冻存的过程中,细胞内易形成冰晶,并破坏细胞结构,做了切片染色后 ...
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