流式细胞术
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球,细菌,小型模式生物等)逐个进行快速定量分析和分选的技术。作为应用流式细胞术进行检测的技术平台,现代流式细胞仪产生于上世纪六七十年代。经过近四十年的发展和完善,今天的流式细胞仪已经十分成熟,并被广泛的运用于从基础研究到临床实践的各个方面,涵盖了细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、遗传学及临床 ...
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细胞增殖检测:CFSE
原理:荧光染料CFSE 也可称为 CFDA SE(56- carboxyfluorescein diacetatesuccinimidyl ester) 即羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂 是一种可穿透细胞膜的荧光染料具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧光素二醋酸盐基团这使得CFSE 成为一种良好的细胞标记物。当CFSE以含有两个乙酸基团和一个succinimidyl ...
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流式细胞术数据处理与分析
流式细胞术数据处理与分析 数据的显示通常可分为一维单参数直方图(histogram plot)、二维点图(dot plot)、二维等高图(contour)和假三维图(pseudo 3D)等。下面简述最常用的单参数直方图和二维点图。 1.单参数直方图 单参数直方图是一维数据用得最多的图形,可用来进行定性分析和定量分析。横坐标表示荧光信号或散射光信号强度的相对值,其单位用“道数”(c ...
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PI染色检测细胞周期protocol
1离心收集细胞,弃上清,用预冷PBS洗细胞两次,2 加入预冷70%乙醇,于4℃固定过夜,或-20℃长期固定。(4℃过夜一般隔天就进行检测,如果想推迟几天测,那就保存在-20℃,有资料说-20℃可以保存一个月,个人建议尽量在最短时间内检测,有些实验是在不同时间点上收细胞,这时我就等最后一次固定完了一块测,基本上也多在一周内检测完毕,没有特地去比较保存时间对检测结果的影响)3 细胞染色:离心收集细胞, ...
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