Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项
Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),是指外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞(Lymphocyte)、单核细胞(Monocyte)、树突状细胞(DC)和其他少量细胞。PBMC 可利用健康人或动物供体的外周血,通过 Ficoll 密度梯度离心,磁珠分选等步骤获得,主要包括淋巴细胞和单核细胞。Ficoll 是蔗糖的多聚体,中性,平均分 ...
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人外周血中 CD4 T 细胞分选实例
BioLegend MojoSort™ 磁珠分选实验分享:一、免疫磁珠分选简介免疫磁珠分选是一种从复杂的细胞混合物中分离出高纯度细胞的方法。基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合,在外加磁场中,通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中,不带有该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性,不在磁场中停留,从而使细胞得以分离。有两种分选方式,阴性分选及阳性分选。BioLegend 公司的 Moj ...
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外周血单个核细胞(PBMC)分离方法及注意事项
外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),是指外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞(Lymphocyte)、单核细胞(Monocyte)、树突状细胞(DC)和其他少量细胞。1 原理单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其它细胞不同,红细胞和多核白细胞的比重超过1.080,单个核细胞的比重为1.070左右,血小板为1.030左右。因此,可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各 ...
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细胞分离技术
1. 从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。(1)胰蛋白酶 (Trypsin)●在去除不需要的组织后,使用无菌的解 ...
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