【求助】荧光素酶活性,怪怪怪!!!
ddm_anny 各位大虾们,我最近在做一个基因启动子的活性检测,用的是promega 公司的试剂盒,构建了几个5’逐渐缺失的报告基因,做转染的时候用的是跨物种的T98G cell line, 选择peGFP来估计转染效率,同时用PGL-3-Control和PGL-3-Basic来估计整个测量系统,结果显示转染效率还是可以,主要是PGL-3-Control组的荧光素酶活性值达到25万,同时PGL-3-Basic组的读数还不到100,也就 ...
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【求助】PKC激活程度测定
licanming 我的实验是用VEGF处理细胞后测定细胞PKC激活水平,拟采用Western blot的方法,用ECL法检测,这样分析PKC激活程度结果国际上认可吗?我在Cell Signaling Technology上,查到2261 Phospho-(Ser) PKC Substrate Antibody W IP E D9371 Phospho-PKC (pan) (betaII Ser660) Antibody W IP9921 Phospho-PKC Antibody Sampler K ...
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【求助】抑制NF-κB活性的方法有哪些种?
dcz200210021 想向大虾们请教几个问题,现在抑制NF-κB活性的方法有哪些种? 都各有什么优缺点。有没有些关于这方面的文章可以介绍给我看看。不甚感谢!doctormy 常见的方法有:1、RNAi(NF-κB p65 siRNA):优点特异性较强、缺点价格较高2、针对NF-kB亚基设计的反义寡核苷酸(如NF-κB p65反义寡核苷酸):优点,靶点明确;缺点,抑制效率不如RNAi3、转染IkB-a突变体阻断NF-kB活化:优点,靶点明确;缺点 ...
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【求助】加通路的抑制剂前需要检测这个抑制剂对细胞活性的影响吗?
nulidaodi 加通路的抑制剂前需要检测这个抑制剂对细胞活性的影响吗?从道理上来说应该检测吧!但是很多文献都没有检测,特别是很多抑制剂都是用DMSO溶解的,如何解释,请高手指点,多谢!!pengwu46 一般用DMSO做一个空白对照就可以了,说明DMSO对细胞生长,信号的传导都不影响。如果用通路抑制剂,理论上确实需要检测该抑制剂对其他通路的影响和对细胞生长的影响。一个必须考虑的问题是,通路抑制剂一般特异性都比较低, ...
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