关键词: 生物素 标记 凝集素 组织化学 染色 程序
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生物素标记凝集素的组织化学染色程序
因此,实验中可通过生化反应将凝集素结合在另外的生物素上.当标记生物素的凝集素与组织细胞膜的单糖结合后,再用ABC复合物中亲和素与该生物素结合,在糖基的位置可形成一个较大的复合物,以增加检测的敏感性。其染色程序如下:
1.切片脱蜡处理同前:
2.小鼠肝粉(10ug/ml,PBS配制)或生物素阻断剂孵育切片?室温10分钟,抑制组织中内源性生物素;
3.3%H2O2孵育10分钟(阻断内源性过氧化物酶,避免假阳性),PBS漂洗2次,每次5分钟;
4.用适当稀释度的生物素标记凝集素室温孵育切片45分钟:
5.PBS漂洗2次,每次5分钟;
6.ABC液孵育切片.室温30分钟,用前配制,可按试剂盒说明书操作,将20ul亲和素加20ul HRP标记的生物素,溶解在1.0mlPBS中;
7.PBS漂洗2次。每次5分钟;
8.呈色 加入DAB液暗处10~15分钟,室温;
9.流水冲洗;分钟,必要时可用苏木精复染,光镜观察记录;
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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