关键词: 灭活 封闭 生物素
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灭活内源性酶及封闭内源性生物素
如采用过氧化物酶检测系统或碱性磷酸酶和NBT/BCIP显色系统进行免疫组织化学染色时.酶的作用是催化底物,使显色剂显色,而组织中的内源性酶同样也能催化底物,使其显色,这就影响免疫组织化学染色的特异性。在使用亲和素试剂的免疫组织化学染色中,内源性生物素易结合亲和素,形成亲和素一生物素复合物,导致假阳性。所以在染色之前应设法将组织内的内源性酶灭活或将内源性生物素封闭,以保证染色的特异性。
(1)灭活内源性过氧化物酶:将组织在3%甲醇―H2O2(3ml纯甲醇中加入30%H2020.3ml,现用现配)中室温浸泡10分钟,继而用PBS冲洗3次,每次5分钟。
(2)灭活碱性磷酸酶:最常用的方法是将左旋咪唑(以每毫升加24mg)加入底物液中并保持pH为7.6~8.2,可除去大部分内源性碱性磷酸酶,对于仍能干扰染色的酸性磷酸酶可用0.05mol/L酒石酸抑制。
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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内源性生物素封闭液
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