【求助】请教TOPflash检测
sin_007 本人近日做TOPflash实验检测wnt通路的激活情况,遇到些许问题,希望做过TOPflash assay或了解wnt通路的战友解疑答惑。1、看了些相关文献,既有分别转染TOPflash和FOPflash,结果用TOP/FOP值来表示的;也有只转染TOPflash,然后就用TOP值来表示的。不知这是什么原因,在什么情况下不用FOP? 我因为刚刚接触,用的是分别转染TOPflash和FOPflash,但遇到了 ...
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【求助】如何证明一个蛋白参与一个信号通路
xxshc 我有A蛋白的转基因鼠和对照鼠。想证明A蛋白参与anti CD3激活的T细胞受体TCR信号通路。TCR激活后可以激活ras,MEKK,MEKKK等。是不是我首先看各通路下游的蛋白磷酸化水平在两种鼠之间有无差异。有差异再向上寻找?是可以通过这个初步筛选吗?第一次做信号通路,希望得到大家的帮助。谢谢!kern6549 先不要找参与哪一条通道,先要确定是否参与anti CD3激活的T细胞受体TCR信号通道。可以用常规的活 ...
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【求助】信号通路抑制剂的配制和使用请教
dentist昭安 我刚买了几个信号通路的特异性抑制剂,分别是NF-кB(PDTC)、PI3K/Akt (LY294002)、 p38 MAPK (SB203580) ;看说明书,PDTC的分子量是164.29,PDTC可溶于水(1mg/ml),在DMSO中的溶解度可达到100mM; LY294002 的分子量是307.3,1mg用DMSO配制,浓度为10mg/ml,共0.1ml ;SB203580 的分子量是377.43,1mg用DMSO配制,浓度为20mg/ ...
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在体多通道记录技术的应用及实验流程
1. 大脑与神经元人类大脑由大约 100 亿个神经元组成,神经元之间通过突触相互连接成复杂的功能网络,因而大脑是人体最复杂的器官。目前,人们对大脑的功能机制的认知还停留在较低的水平,研究大脑的功能也成为科学家的终极目标。2013 年 1 月,人脑工程成为欧盟「未来新兴旗舰技术项目」之一,未来 10 年内将获得 10 亿欧元的科研经费。随后,奥巴马宣布将从 2014 财年的政府预算中拿出 1 亿美元,启动"人脑活动图"项目研究(Brain Activity Map project)。 ...
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