关键词: 血液 组织 提取 RNA 方法 区别
来源: 互联网
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问:最近准备分析RNA的表达水平,园子里有人是从组织里面提取,有人从血液提取,想问的是,对于同一个人,这两种提取方法有什么区别吗,两种方法RNA的提取量有区别吗?
答:血液里面提RNA比较麻烦,量也少,前期处理如下:
1、无菌采集静脉血2 ml注入盛有2 ml Hank's液(含100 u/ml肝素)的试管中,混匀。
2、吸取淋巴细胞分层液2 ml加入离心管中,再将稀释抗凝血液小心沿管壁加至分层液上,应注意保持两者界面清晰(关键)。
3、室温2000 r/min离心20 min。管内可分为四层。
4、将上层淡黄色的稀释血浆取出于洁净试管中-20 ℃保存。
5、用毛细吸管轻轻吸出乳白色的单个核细胞,加入另一支已含有2-5 mlHank's液的离心管中,混匀。
6、室温下,1500rpm离心10min。
7、弃上清,重复洗涤一次。用完全RPMI-1640 1 ml定容,计数细胞,调整细胞悬液至所需浓度:一般每ml血可分离出1-2×106个单个核细胞。
淋巴细胞分离出来以后取血和细胞就一样的步骤了:加Trizol裂解细胞,之后进行RNA的抽提
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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