如何做好细胞爬片
细胞爬片可以买专门的爬片,几块钱一小包的,爬片用前泡酸,高压消毒(包括镊子和枪头)。把用过的24孔板清洗干净,一孔一片,很方便,又互不干扰。把细胞培养到对数生长期,消化后再滴上去,爬1-2天贴壁后(中间可加适量培养液),可在板子里一直做完。清洗时,将PBS滴在片子上即可,不要剧烈摇晃。需要照相时候,再取出来,细胞面贴在载波片上,最好用50%甘油,中性树脂贴不好,容易毁坏细胞形态。取爬片时候,可以用 ...
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最全面的MTT相关技巧大汇总
(一)实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不 ...
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【求助】做细胞周期,G0G1期减少,S期增多,G2/M期变化不大说明什么
mccanny 如题,谢谢mccanny 再次求助kern6549 说明细胞增殖增加。ze_quan kern6549 wrote:说明细胞增殖增加。晕,要结合具体细胞生长效应吧俺的也是s期细胞增多,但是抑制增值的,只能说阻滞在S期了吧,具体原因在找找信号通路吧迷者的悟 我的也是。。。不知道怎么回事。。药物处理后细胞S期增加明显。。。G1 G2期变化不明显。。不知道是何原因。。文献该药物可将癌细胞阻滞在G2期。。。希望高手能够解释一下。。作用时间问题 ...
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悬浮细胞如何进行传代?
由于细胞已经在生长培养基中悬浮,所以无需酶的作用使其从培养容器表面脱离,方法简单。材料准备:1、装有悬浮细胞的培养容器。2、完全生长培养基,预热至 37℃。3、37℃ 培养箱,充有二氧化碳浓度为 5% 的湿化空气。传代流程:一、直接传代法1、待悬浮细胞长满至 80%~90%(细胞悬液变黄),即可传代;2、用吸管吸弃细胞悬液 1 / 2~1 / 3;3、加入适量的新鲜培养基,继续培养。二、离心传代法(在发现有细胞碎片的情况下)1、将细胞悬液转移到离心管内;2、150 g 离心 5 min,弃 ...
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