关键词: 细胞传代 增殖
来源: 丁香园
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由于细胞已经在生长培养基中悬浮,所以无需酶的作用使其从培养容器表面脱离,方法简单。
材料准备:
1、装有悬浮细胞的培养容器。2、完全生长培养基,预热至 37℃。3、37℃ 培养箱,充有二氧化碳浓度为 5% 的湿化空气。传代流程:
一、直接传代法
1、待悬浮细胞长满至 80%~90%(细胞悬液变黄),即可传代;2、用吸管吸弃细胞悬液 1 / 2~1 / 3;3、加入适量的新鲜培养基,继续培养。
二、离心传代法(在发现有细胞碎片的情况下)
1、将细胞悬液转移到离心管内;2、150 g 离心 5 min,弃去上层清液;3、使用新鲜的培养基重悬细胞;4、吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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