关键词: PI 染色法 活细胞 细胞凋亡
来源: 互联网
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染料及试剂
1. 含0.1%TritonX-100的PBS缓冲液(pH7.4)
2. PI染液:将PI(碘化丙啶)溶于含0.1%TritionX-100的PBS中,终浓度为50μg/ml,含RNase 100μg/ml,避光保存。
3. 荧光显微镜
操作方法
制备凋亡细胞悬液,浓度为106 /ml;
取1ml的细胞悬液,加10μl的PI染液混合,作用10min;
加入5ml PBS,1500r/min离心5min,弃上清,重复洗涤2次;
重悬细胞,滴片并用盖玻片封片;
结果判断
在荧光显微镜下选用大于536nm的激发光观察:正常活细胞胞核被PI着染呈红色;早期凋亡细胞胞核浓缩,染色加深,或核染色质聚集于核膜一边,呈新月状;晚期凋亡细胞胞核碎裂成大小不等的原形小体,并被细胞膜所包绕,即凋亡小体。
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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