关键词: DAPI染色法 细胞凋亡
来源: 互联网
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材料与试剂
含0.1%Triton X-100的PBS缓冲液;
DAPI染料(4,6-diamidino-z-phenylindole)100μg,溶于100ml含0.1%TritionX-100的PBS缓冲液中,避光保存。
操作方法
将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化(按HE染色的脱蜡方法),用PBS洗5min;
或冰冻切片用冰丙酮固定15min,吹干,用PBS洗5min;
或细胞涂片或细胞甩片用0.1%多聚甲醛固定30min,用PBS洗5min;
将以上制备好的片子,浸泡在装有DAPI染液的染色缸中,避光作用10min。
用盖玻片封片。
结果判断
置于荧光显微镜下用359nm激发光观察结果:DAPI染色呈蓝白色荧光。早期凋亡细胞呈现核浓缩, 染色加深,或核染色质呈新月形聚集于核膜一边;晚期凋亡细胞表现为核碎裂成大小不等的圆形小体,并被细胞膜所包绕,即凋亡小体
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还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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DAPI染色液 细胞凋亡与增殖
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