来源: 丁香园
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PromoCell的人类心肌细胞的来源PromoCell的人类心肌细胞(HCM)分离自成人心脏的心室,该组织来源于正在进行心脏移植的患者的外植心脏。a)当一个大样本的心肌进行了灌注和不完全消化时,会分离得到的杆状的心肌 细胞。其中一些细胞会自发进行常规的收缩,而其它一些只有受到刺激时才会收缩。由于其收缩功能,它们通常能用于生理研究。然而,有规律的肌节排布,会阻止大多数的细胞附着到TC培养皿上,因此,它们在体外是无法生长的。b)而另外一种情况下,当成人心肌进行的是完全消化,则可以分离和培养到一些没有肌节的细胞。这i细胞是球形的,容易附着到培养皿中并且增殖。虽然他们不具备自发性收缩的能力,但是它们具有正常的心肌细胞在体外的许多特点。PromoCell HCM提供的就是这些球形细胞。这种细胞经证实具有类似祖细胞的分化能力。但是,到现在为止,还没有操作方案可以诱导我们的HCM的 收 缩活动。应用领域:心脏研究,药理研究 培养中的人类心肌细胞HCM的形态在体外培,根据细胞培养密度的不同,HCM表现出两种不同的显著形态特征。当细胞以较低密度培养时,HCM会长得比较肥,细胞延展性差,显得比较短(如图1a)。当细胞密度逐渐增加时,心肌细胞则呈现第二种形态。心肌细胞开始 细,拉长并开始在彼此上层生长而形成团块(如图1b)。在这些团块之间,稍肥大的细胞平行排列。 适用于HCM的体外生是培养墓 PromoCell为HCM的生长和增殖开发了一种专门的培,基。PromoCell的心肌细胞生长培,基所含血清浓度很低(5%V /V),并添加有优选的激素和生长因子。培养墓的质量控制 PromoCell每一批次的人类心肌细胞都进行严格的质量控制检验。HCM的检测参数包括细胞形态,贴壁率和 细胞活性。此外,使用流式细胞仪分析心肌细胞特异的标记物。另外,在各个倍增数阶段都进行生长性能测 试,一直进行检测到15个倍增数以上。 PromoCell HCM的指控指标活性■检测活细胞的比率■保证每一 支冻存管中的活细胞数>500,000 生长性能测试■测定对数生长期的倍增时间■检验各支细胞能培养到15个倍增数以上 表型特征■通过流式细胞仪检测细胞类型特异性的标记物 HCM的体外培养过程 PromoCell为HCM的生长和增殖开发了一种专门的培,基。 PromoCell的心肌细胞生长培,基所含血清浓3很低(5%V/V),并添加有优选的激素和生长因子。 在PromoCell的HCM的长期体外培养过程中,分化阶段的各个不同标记物的表达情况会有变化。随着HCM培养时间的进一步延长,则稍晚期分化阶段的一i标记物的表达呈阳性,并且有20%以上的HCM对最终分化阶 段的标记物呈现阳性。 当生长到一定密度时,PromoCell的HCM开始分化,并在一段时间以后达到最终的分化状态。分化过程可以通过长期培养后的形态学改 以及各阶段特异性的标记物的出现而得到证实。PromoCell的HCM的形态随着时间而改变。肌管状的结构是分化状态的心肌细胞的典型标记物,可以在培养的一开始就被检测到。之后,随着细胞密度逐渐增大,肌管开始形成分支状结构。这些分 支状的结构是最终分 化状态的心肌细胞的典型形态特征。 结果中的结论可以由对PromoCell培养,过程h45-间点的分化标记物的分析来证%。当观察到肌管样构时,就会检测c后期分化阶段的标记物。随着培养时间的延长,呈现出后期分化状态的HCM数量增加,并且开始有20%以上的HCM表达最终分化状态的一些特异性标记物。在这些时间点,PromoCell的HCM开始形成分支状结构。 体外培养的PromoCell的HCM特点: ■增殖h的HCM处于较早期的分化阶段。
■HCM可以达到15个倍增数以上,具有极强的增殖能力。
■当HCM生长到一定密度时,分化过程开始。
■HCM能形成肌管状结构和分支状结构。
■在培养中,HCM可以达到最终的分化状态。
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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